S-1聯(lián)合納米粒白蛋白結(jié)合型紫杉醇治療胰腺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、胰腺癌惡性程度很高，具有極高的病死率，五年生存率低于5％。手術(shù)是目前唯一可能根治胰腺癌的方法，但由于胰腺癌缺乏早期特異性癥狀，且病程短，進(jìn)展快，僅靠手術(shù)治療無法取得理想的效果，胰腺癌化療的價(jià)值無法忽視。S-1和納米粒白蛋白結(jié)合型紫杉醇(nab-paclitaxel)是近年來在臨床試驗(yàn)中取得良好療效的兩種藥物，但兩者聯(lián)用治療胰腺癌的效果尚未有相關(guān)研究。本研究在此背景下，研究S-1聯(lián)用nab-paclitaxel治療胰腺癌的效果，并探索與化

2、療敏感性可能相關(guān)的生物標(biāo)記物，旨在為胰腺癌患者提供一種新的化療方案，并為個(gè)體性化療提供依據(jù)。腫瘤組織嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)小鼠移植瘤模型可以較為準(zhǔn)確的模擬人體腫瘤的遺傳、組織特征，與傳統(tǒng)的腫瘤細(xì)胞系模擬實(shí)驗(yàn)相比，該模型具有更大的樣本含量和更加豐富的遺傳多樣性，因此其結(jié)果更有代表性和說服力，對(duì)可能的后續(xù)臨床試驗(yàn)具有更高的參考價(jià)值，并且可以用來探索與腫瘤化療敏感性相關(guān)的生物標(biāo)記物。本研究依托于復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院普外科，以獲取足量的胰

3、腺癌手術(shù)切除標(biāo)本，建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行藥效試驗(yàn)，并對(duì)比各移植瘤間藥效的差異及與蛋白表達(dá)情況。研究分為兩部分:
　　第一部分 胰腺癌組織SCID小鼠移植瘤模型的建立和藥效試驗(yàn)
　　目的:建立胰腺癌組織SCID小鼠移植瘤模型，并在此基礎(chǔ)上觀察S-1聯(lián)合nab-paclitaxel治療胰腺癌的效果。
　　方法:在無菌條件下從手術(shù)室取得人胰腺癌切除標(biāo)本，及時(shí)移植到SCID小鼠的雙側(cè)皮下，待移植瘤長至500-

4、1000mm3時(shí)移植給下一代小鼠。待移植瘤傳至第三代時(shí)進(jìn)行分組給藥，每組10-12只，共四組，分別為:對(duì)照組（不予處理）、S-1組（每周的第一至五天給予10mg/kg S-1灌胃，持、續(xù)4周）、nab-paclitaxel組（第1至5天連續(xù)予以nab-paclitaxel30mg/kg，從尾靜脈緩慢注入）、S-1聯(lián)合nab-paclitaxel組（S-1及nab-paclitaxel用法如前述）。第29天處死荷瘤鼠，收樣。
　　結(jié)

5、果:共移植胰腺癌導(dǎo)管腺癌12例，成瘤者10例，平均成瘤率為83.33％。第一代腫瘤的平均成瘤時(shí)間為62±25天，第二代腫瘤的平均成瘤時(shí)間為47±17天，第三代腫瘤的平均成瘤時(shí)間為33±8天。S-1組、Nab-paclitaxel組、S-1聯(lián)合nab-paclitaxel組的平均腫瘤抑制率(TGI)分別為69.52％、86.63％、103.56％，各組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組的平均重量為1.66g，S-1組的平均重

6、量為0.59g，nab-paclitaxel組的平均重量為0.43g，S-1聯(lián)合nab-paclitaxel組的平均重量為0.13g，各組之間的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)
　　結(jié)論:在胰腺癌組織SCID小鼠移植瘤模型上，S-1單藥、nab-paclitaxel單藥、S-1聯(lián)合nab-paclitaxel均可有效抑制胰腺癌移植瘤的生長，其中S-1聯(lián)合nab-paclitaxel取得了較S-1單藥或nab-paclitaxel

7、單藥更好的治療效果。
　　第二部分 化療敏感性生物標(biāo)記物的篩查
　　目的:探索與胰腺癌對(duì)S-1聯(lián)合nab-paclitaxel化療敏感性相關(guān)的生物標(biāo)記物
　　方法:通過查閱文獻(xiàn)選定一些與S-1及nab-paclitaxel化療效果相關(guān)的蛋白，采用免疫組化法測(cè)定其在各移植瘤中的表達(dá)情況，具體包括:胸苷酸合成酶(TS)、乳清酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(OPRT)、二氫嘧啶脫氫酶(DPD)、富含半胱氨酸酸性分泌蛋白(SPARC)、人類

8、表皮生長因子受體2(HER2)。按照各蛋白表達(dá)陽性或陰性將各例移植瘤進(jìn)行分組，比較陽性組與陰性組各給藥組的平均TGI差別。同時(shí)檢測(cè)各移植瘤各給藥組Collagen-1與CD31的表達(dá)情況，觀察藥物對(duì)胰腺癌間質(zhì)及間質(zhì)血管的影響。
　　結(jié)果:TS陽性移植瘤S-1組的平均TGI為48.41％，TS陰性移植瘤S-1組平均TGI為83.59％（P＜0.05）;DPD陽性移植瘤S-1組的平均TGI為89.5％，DPD陰性移植瘤S-1組平均TG

9、I為56.16％（P＜0.05）;OPRT陽性移植瘤S-1組的平均TGI為53.43％，OPRT陰性移植瘤S-1組平均TGI為85.62％(P＜0.05); SPARC陽性移植瘤nab-paclitaxel組的平均TGI為90.58％，SPARC陰性移植瘤nab-paclitaxel組平均TGI為80.72％(P＜0.05)。其余各蛋白的表達(dá)與否，各給藥組TGI的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。Nab-paclitaxel組及聯(lián)合給

10、藥組Collagen-1的含量低于對(duì)照組及S-1組（P＜0.05），nab-paclitaxel組及聯(lián)合給藥組CD31的含量高于對(duì)照組及S-1組（P＜0.05）。
　　結(jié)論:TS、DPD、OPRT與胰腺癌對(duì)S-1的化療敏感性相關(guān)，其中TS低表達(dá)、DPD高表達(dá)、OPRT低表達(dá)的胰腺癌對(duì)S-1較為敏感;SPARC與胰腺癌對(duì)nab-paclitaxel的化療敏感性相關(guān)，SPARC高表達(dá)的胰腺癌對(duì)nab-paclitaxel較為敏感。但本