乙型肝炎病毒蛋白HBx和Polymerase果蠅模型的構(gòu)建.pdf

1、乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)是全世界最普遍也是最嚴(yán)重的傳染病之一。HBV是肝病毒科的成員之一，全基因組長度為3.2kb的部分雙鏈結(jié)構(gòu)，它包含四個(gè)開放的閱讀框:S，C，P，X。其中P和X分別編碼對病毒復(fù)制至關(guān)重要的蛋白，Polymerase和HBx。其中Polymerase在以負(fù)鏈為模板延伸正鏈并進(jìn)行修復(fù)形成cccDNA的過程中起到了重要作用。而HBx是一個(gè)多功能的調(diào)節(jié)蛋白，與肝癌的發(fā)生緊密相關(guān)。HBx的功能主要

2、涉及到轉(zhuǎn)錄，蛋白質(zhì)降解，信號傳導(dǎo)，細(xì)胞增殖，細(xì)胞周期，衰老，自噬和凋亡等。
　　 為了能獲得在體內(nèi)研究HBV的致病機(jī)制及其活體的相關(guān)免疫機(jī)制，我們建立了HBV的果蠅模型，在這個(gè)模型里對HBV的靶蛋白HBx和Polymerase進(jìn)行了過表達(dá)。首先，我們克隆了HBx和Polymerase的全序列，并連接到果蠅專用顯微注射載體pUAST中。然后，我們利用顯微注射技術(shù)獲得了轉(zhuǎn)基因果蠅。之后，我們把轉(zhuǎn)基因果蠅與相應(yīng)的GAL4果蠅雜交使HB