HPO-205與EDAG基因的克隆與功能研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文HPO205與EDAG基因的克隆與功能研究姓名：閭軍申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：傳染病指導(dǎo)教師：蔡衛(wèi)民2001.10.1博士學(xué)位論文HPO205與EDAG基因的克隆與功能研究HPO一205與EDAG基因的克隆與功能研究中文摘要浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院九九級博士研究生導(dǎo)師內(nèi)科學(xué)(傳染病專業(yè))閭軍蔡衛(wèi)民研究員哺乳動物新生肝及胚胎肝中存在特異刺激肝細胞增殖的細胞活性因子。f1994年～——一～Hagiya等報道從新生鼠肝中分離出肝再生增

2、強因子(augmenterofliverregeneration，ALR)，并完成其分子克隆。Hagiya等報道的ALRmRNA為12kb，編碼125個氨基酸組成，分子量約為15kD的蛋白質(zhì)，具有刺激肝細胞增殖的活性。隨后一些研究發(fā)現(xiàn)在鼠肝組織中用Westernblot可以檢測到2330kD的陽性區(qū)帶，并認為這可能與ALR具有同源二聚體結(jié)構(gòu)有關(guān)。近來有研究發(fā)現(xiàn)，ALR實際上存在13kb和27kb兩種轉(zhuǎn)錄形式，提示可能存在由不同翻譯起始位

3、點致不同翻譯產(chǎn)物的可能性。1996年我國學(xué)者楊曉明等率先克隆出ALR的人類同源分子一肝細胞生成素(HPO)。人HPO由125個氨基酸組成，分子量約1x5kD。新近，多個實驗室報道了不同的人HPO／ALR／ERVImRNA序列，分析這些序列我們發(fā)現(xiàn)這些序列具有共同的3t端序列，而其5端則長短不一，并且在編碼人HPO起始密碼子ATG前同一閱讀框架不含有任何終止密碼子。提示這些mRNA可能在5端不完整。進一步分析人HPO基因組序列發(fā)現(xiàn)在HPO

4、起始密碼子上游同一閱讀框上有另外一個ATG，、并可形成一個較大的閱讀框架。這些分析提示我們在體內(nèi)可能存在新的HPO形式。、利用5’Race技術(shù)從人胎肝組織中分離一種新形式的肝細胞生成素(HPO一205)cDNA，其編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的N端較已報道人肝細胞生成素|HPO(hepatopoietin)多80個氨基酸。淇推測蛋白質(zhì)分子量為23kD。RT—PCR檢測?！?。一’～＼HPOmRNA在多種肝癌細胞中表達，Westernblot可檢