蟾毒靈抗多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的效應(yīng)及機(jī)制研究.pdf

1、多發(fā)性骨髓瘤（MM）被認(rèn)為是一種進(jìn)行性與不可治愈性的漿細(xì)胞惡性增殖性疾病。其治療以化療為主，而目前臨床的一線化療藥物由于病人的耐受性，腫瘤細(xì)胞的耐藥性及較強(qiáng)的藥物副作用等原因，化療效果不佳，因此尋找新的藥物和發(fā)現(xiàn)新的疾病靶向治療方法是當(dāng)前研究的主要方向。我們知道聚腺苷酸二磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1（PARP1)與DNA的損傷修復(fù)是密切相關(guān)的，其相應(yīng)的抑制劑在多種腫瘤中發(fā)揮著強(qiáng)有效的“合成致死”或化療增敏劑的效應(yīng)；另一方面有文獻(xiàn)指出多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞

2、內(nèi)PARP1的高水平表達(dá)與病人的不良愈后相關(guān)，而PARP1抑制劑用于治療MM也已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。因此，我們認(rèn)為通過靶向抑制PARP1活性而治療MM方法是可行的，并且有相當(dāng)意義。
　　蟾毒靈（Bufalin）是一種從中華大蟾蜍（亞洲蟾蜍）的毒液蟾酥中分離出來的類固醇物質(zhì)。其顯著的抗腫瘤效應(yīng)已在多種腫瘤細(xì)胞中得到證實(shí)，尤其是在抗白血病的研究方面，取得了重要的成果，但該化合物的靶點(diǎn)機(jī)制尚未詳盡。在此基礎(chǔ)上，本課題組證實(shí)了蟾毒靈在MM中

3、有強(qiáng)有效的抗腫瘤效應(yīng)，并進(jìn)一步闡述了其相應(yīng)的靶點(diǎn)機(jī)制，以及與其他化療藥的聯(lián)合情況。本文主要取得如下研究成果：
　　（1）蟾毒靈具有顯著的抗多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞效應(yīng)。運(yùn)用 CCK8及苔盼藍(lán)染色計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)蟾毒靈對MM細(xì)胞有顯著的增殖抑制及引起細(xì)胞死亡作用，應(yīng)用瑞氏染色、Western blot及流式檢測，我們發(fā)現(xiàn)蟾毒靈可誘導(dǎo)MM細(xì)胞凋亡并引起細(xì)胞周期抑制。
　　（2）蟾毒靈靶向PARP1發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。使用DARTS技術(shù)及PARP1活

4、性試劑盒檢測確定了蟾毒靈與PARP1的直接靶向結(jié)合及對其的活性抑制作用，并用對接軟件分析了兩者的結(jié)合方式。鑒于此，我們進(jìn)一步探討了此靶點(diǎn)抑制作用，對蟾毒靈抗 MM作用方面的影響。
　?。?）蟾毒靈顯著加強(qiáng)其他化療藥抗多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞的效應(yīng)。結(jié)合PARP1抑制劑臨床增敏劑的角色，我們用CCK8檢測證實(shí)了蟾毒靈有顯著加強(qiáng)拓?fù)涮婵档菵NA損傷修復(fù)相關(guān)的化療藥的抗腫瘤作用。
　　綜上，本課題組發(fā)現(xiàn)蟾毒靈具有強(qiáng)有效的抗MM腫瘤細(xì)胞作用