β1腎上腺素能受體抗體對小鼠心室肌細(xì)胞鉀離子通道作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究背景:心肌細(xì)胞膜表面的離子通道是心肌細(xì)胞電活動和機(jī)械活動的基礎(chǔ)，在其中鉀離子通道的電流在左心室心肌細(xì)胞復(fù)極過程中起著重要的作用。1990年，有研究從原發(fā)性擴(kuò)張型心肌病(idiopathic dilated cardiomyopathy，IDCM)患者血清中發(fā)現(xiàn)了抗β1腎上腺素能受體的自身抗體[1]，隨后，在心力衰竭患者的血清中也有發(fā)現(xiàn)了抗β2及抗β3腎上腺素能受體的自身抗體的報道出現(xiàn)[2]。自身免疫反應(yīng)的發(fā)生在各種原因?qū)е碌男牧λソ?/p>

2、的過程中可能發(fā)揮著重要的作用[3-5]。但自身抗體對于心肌細(xì)胞的電生理作用尚不十分清楚。
　　 目的:采用β1腎上腺素能受體抗體(anti-ADRβ1)模擬自身抗體，研究其對小鼠心室肌細(xì)胞鉀離子通道的作用。
　　 方法:雄性健康清潔級昆明種小鼠，酶解法分離小鼠心室肌細(xì)胞，以不同稀釋比例anti-ADRβ1灌流心肌細(xì)胞，膜片鉗電生理技術(shù)記錄鉀離子通道電流的變化。應(yīng)用1GOR和Origin軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，測量電流的峰值為瞬

3、時外向鉀通道電流I1o，測量最后50ms處平臺期電流為Iss，電流值以電流密度(pA/pF)表示，以不同鉗制電壓下的電流密度繪成電流-電壓(I-V)曲線。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0軟件，計(jì)量資料以x±s表示，組間差異用方差分析和兩兩比較的q檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:(1)正常心室肌細(xì)胞外向K+通道電流特性：在正常細(xì)胞外液中用ChCl代替NaCl以阻斷鈉離子通道后，小鼠心室肌細(xì)胞記錄出外向鉀離子電流

4、，包括激活快、失活也快的Ito和激活緩慢基本不失活的Iss；(2)用CdCl阻斷鈣離子通道后，小鼠心室肌細(xì)胞同樣記錄出外向鉀離子電流；(3)anti-ADRβ1對Ito的作用：依次以不同稀釋比例anti-ADRβ11/500、1/100、1/50的細(xì)胞外液分別灌流5min后，Ito電流密度(pA/pF)無明顯改變（P＞0.05），對Ito電流電壓曲線也沒有影響；(4)anti-ADRβ1對Iss的作用：與正常外液時Iss電流(4.7±0

5、.24pA/pF)比較，anti-ADRβ11/500時Iss電流密度（3.6±0.18pA/pF）降低，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），anti-ADRβ11/100和anti-ADRβ11/50時電流密度明顯降低(P＜0.05)分別為（3.5±0.18）和（3.1±0.15），具有明顯的劑量依賴性，但是對于其電流電壓曲線沒有明顯作用。
　　 結(jié)論:β1腎上腺素能受體抗體可以抑制小鼠心室肌細(xì)胞Is通道而對Ito無影響，其作