尿毒癥繼發(fā)性甲旁亢發(fā)病機(jī)制及其手術(shù)治療的研究.pdf

1、第一部分：甲狀旁腺全切加自體前臂移植治療尿毒癥繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)的療效觀察 目的和方法 回顧性分析我院1997．5—2005．8月12例接受甲狀旁腺全切加自體前臂移植術(shù)的患者。以治療前后作為自身對(duì)照，旨在了解甲狀旁腺術(shù)前B超定位與術(shù)中直接定位的符合率；觀察術(shù)前術(shù)后血鈣磷代謝、甲狀旁腺激素(intactparathyroidhormone，iPTH)、貧血、脂質(zhì)代謝及透析充分性(KT／V、UUR)的變化。進(jìn)而對(duì)手術(shù)治療

2、繼發(fā)性甲旁亢的安全性和有效性給予客觀的評(píng)價(jià)。 結(jié)果 12例患者平均切除甲狀旁腺結(jié)節(jié)3．4枚，甲狀旁腺總重量平均為3．06g。10例患者術(shù)中所切除的甲狀旁腺結(jié)節(jié)與術(shù)前B超定位完全一致，符合率達(dá)95．2％。有1例患者在手術(shù)探查中新發(fā)現(xiàn)一枚較小的甲狀旁腺結(jié)節(jié)約0．5cm。，另有1例患者在術(shù)后3月B超發(fā)現(xiàn)頸部殘留1枚甲狀旁腺結(jié)節(jié)。 術(shù)后血鈣、磷(mmol／1)1周(2．261±0．313、1．277±0．206)、1月(

3、2．205±0．226、1．267±0．¨6)、3月(2．158±O．192、1．328±0．181)、6月(2．276±0．319、1．288±0．196)、12月(2．196±0．284、1．386±0．214)，較術(shù)前血鈣、磷(3．033±0．185、2．258±0．334)明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

4、7．7)、6月(168．64±76．65)、12月(196．54±104．6)較術(shù)前血iPTH(1690．32±397．8)明顯下降，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

5、mol／1)較術(shù)前(2．07±0．47mmol／1)明顯下降，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

6、)升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

7、中是否同樣存在COX2的異常表達(dá)以及在不同增生程度的組織中表達(dá)有無差異，為今后的臨床防治繼發(fā)性甲旁亢提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 收集我院2004．3—2006．1開展甲狀旁腺全切加白體前臂移植術(shù)后的甲狀旁腺結(jié)節(jié)共26個(gè)。按照舵染色的形態(tài)學(xué)將其分為輕度彌漫性增生(腺泡結(jié)構(gòu)輕度破壞，其結(jié)構(gòu)可見)、重度彌漫性增生(腺泡結(jié)構(gòu)明顯破壞，其結(jié)構(gòu)可以辨認(rèn))及結(jié)節(jié)性增生(基本沒有腺泡結(jié)構(gòu)，比較均一細(xì)胞)。采用免疫組化及免疫印跡的方法觀察不同程

8、度增生的甲狀旁腺組織COX-1、COX2及增生指標(biāo)PCNA的表達(dá)。 結(jié)果 26個(gè)結(jié)節(jié)中只有8個(gè)為彌漫性增生，其余18個(gè)結(jié)節(jié)均為結(jié)節(jié)性增生。免疫組化結(jié)果顯示在增生的甲狀旁腺組織中存在少量的COX-l的表達(dá)，然而COX2及PCNA的表達(dá)明顯增加。免疫印跡發(fā)現(xiàn)在不同增生程度的甲狀旁腺組織中COX2的表達(dá)存在差異：重度彌漫性增生的甲狀旁腺組織COX2的表達(dá)要高于輕度彌漫性增生及結(jié)節(jié)性增生的甲狀旁腺組織，分別為1．45倍和1．6倍

9、(P

10、細(xì)胞PCNA的表達(dá)一致，提示局部的COX可能參與了甲狀旁腺細(xì)胞的增生。 第三部分：尿毒癥維持性血液透析患者fin_前列腺素水平與甲狀旁腺激素的關(guān)系 本試驗(yàn)第二部分在尿毒癥增生的甲狀旁腺細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了COX2的表達(dá)，并且推測(cè)其表達(dá)可能與甲狀旁腺細(xì)胞的增生有關(guān)。為了進(jìn)一步闡明是甲狀旁腺結(jié)節(jié)內(nèi)局部的COX2增多導(dǎo)致的甲狀旁腺細(xì)胞增生，還是由于尿毒癥患者存在前列腺素代謝紊亂所致的局部作用。本研究觀察了不同甲狀旁腺水平的尿毒癥患者中

11、花生四烯酸的環(huán)氧化酶代謝產(chǎn)物的水平。 花生四烯酸的環(huán)氧化酶途徑中產(chǎn)生的前列腺素PGH2、P612及TXA2均為不穩(wěn)定的產(chǎn)物，在體內(nèi)經(jīng)過復(fù)雜催化反應(yīng)，最終代謝為比較穩(wěn)定的PGE2、6一酮一前列腺素F1α及TXB2。 方法 選擇我院血液凈化中心的維持性血液透析患者60名，按照不同PTH的水平分為：A組：PTH300pg／ml各20名。

12、D組：正常成人10名作為對(duì)照組。以放免法分別測(cè)定四組患者血漿PGE2、6一酮一前列腺素F1Q及TXB2的水平。 結(jié)果 尿毒癥A、B、C組患者血漿PGE2水平分別為450．2±223．25ng／l、346．92±165．89ng／l、419．08±198．18ng／l較正常對(duì)照組206．23±138．6ng／l均有不同程度的升高(P0．05)。尿毒癥A、B、

13、C組患者血漿TXB2水平分別為253．36±282．32ng／1、191．76±82．23ng／l、223．24±238．62ng／l，較正常對(duì)照組146．3±79．5ng／1均有不同程度的升高(P<0．05)；但不同PTH水平的A、B、C三組之間無明顯差異(P>0．05)。尿毒癥A、B、C組患者血漿6一Keto—PGFlQ水平分別為8．39±4．5n圣／l、8．54±5．98ng／1、7．26±5．97ng／l，較正常對(duì)照組18．6±

14、8．7明顯下降(P<0．01)；但不同PTH水平的A、B、C三組之間無明顯差異(P>0．05)。 結(jié)論 尿毒癥血液透析患者存在血漿前列腺素水平代謝的紊亂。但是不同PTH水平的尿毒癥患者環(huán)氧化酶2的代謝產(chǎn)物前列腺素水平無差異。 第四部分：磷通過COX一2途徑促進(jìn)人原代甲狀旁腺細(xì)胞增生體外的研究 本試驗(yàn)的第二、三部分提示局部COX2可能參與了部分甲狀旁腺細(xì)胞增生的發(fā)生與發(fā)展。為了進(jìn)一步明確高磷能否通過刺激CO

15、X2的表達(dá)來促進(jìn)細(xì)胞的增生，本試驗(yàn)實(shí)使用原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來觀察其在高磷培養(yǎng)刺激對(duì)甲狀旁腺功能及增生的影響。 方法 術(shù)后的甲狀旁腺組織按照文獻(xiàn)報(bào)道原代培養(yǎng)甲狀旁腺細(xì)胞。采用不同濃度的磷(高磷、正常磷)來刺激原代培養(yǎng)的甲狀旁腺細(xì)胞。測(cè)定培養(yǎng)液中的PTH來觀察細(xì)胞的分泌功能。通過免疫印跡和RealTimePCR來觀察細(xì)胞COX2及PCNA的蛋白和基因表達(dá)。 結(jié)果 高磷培養(yǎng)液能夠刺激體外培養(yǎng)的原代甲狀旁腺