富血小板血漿對(duì)骨缺損區(qū)非血管化結(jié)構(gòu)性移植骨再血管化與骨改建實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過建立動(dòng)物骨缺損實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?觀察不同頻次使用富血小板血漿(PRP)對(duì)骨缺損區(qū)非血管化結(jié)構(gòu)性植骨血管化以及骨改建的影響。
　　方法:實(shí)驗(yàn)選取45只新西蘭大白兔,6-8月齡,體重2.0-2.5kg,隨機(jī)分為A、B、C三組,每組15只。A組為對(duì)照組,B組為使用一次PRP組,C組為多次使用PRP組。B、C兩組采用局麻下切開,用加有抗凝劑試管采股靜脈血5ml,用二次離心法制作 PRP,并分別對(duì)全血和PRP中血小板計(jì)數(shù)。PRP使用前需要

2、按4:1比例加入激活劑(含有1ml10％氯化鈣和1000u凝血酶)制成PRP凝膠。三組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別建立橈骨中上段1cm骨缺損模型,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)選擇左側(cè)或者右側(cè)橈骨,連同骨膜一起切除橈骨中上段1cm,制造節(jié)段性骨缺損,并于同側(cè)取自體髂骨植入缺損區(qū)。A組單植入自體髂骨,B組植入加有激活劑的PRP和髂骨混合物,C組植入加有激活劑的PRP和髂骨混合物。并于術(shù)后1、3、5周,C組于骨缺損區(qū)注射0.5ml加有激活劑的PRP,A、B兩組只注射等量的激

3、活劑。分別于術(shù)后2、4、8周時(shí)處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,各組隨機(jī)處死5只,分別對(duì)標(biāo)本進(jìn)行大體標(biāo)本觀察,X線攝片,病理切片HE染色和免疫組化CD34染色觀察。對(duì)X線結(jié)果依據(jù)Lane-Sandhu骨移植X線評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分,對(duì)病理切片進(jìn)行圖像分析,測(cè)量新生骨面積百分比,CD34染色計(jì)數(shù)微血管密度。
　　結(jié)果:全血中血小板平均濃度為325.25×109/L,PRP中平均血小板濃度為1308×109/L,PRP中血小板計(jì)數(shù)是全血中血小板計(jì)數(shù)的4.02倍。

4、術(shù)后2周,三組大體標(biāo)本觀察無明顯差異,X線攝片未見明顯骨痂生成,骨移植X線評(píng)分為0分。B、C組新骨形成、新生血管密度均高于A組(PA-B=0.001,PA-C=0.001),C組與B組新生骨百分比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PB-C=0.089),C組新生血管密度高于B組(PB-C=0.018)。術(shù)后4周B、C兩組骨放射學(xué)評(píng)分高于A組(PA-B=0.047,PA-C<0.001),C組放射學(xué)評(píng)分高于B組(PB-C=0.024), B、C兩組新生骨

5、痂百分比高于A組(PA-B<0.001,PA-C<0.001),C組新生骨痂百分比高于B組(PB-C=0.03), B、C兩組新生血管密度高于 A組(PA-B<0.001,PA-C<0.001),C組新生血管密度高于B組(PB-C=0.002)。術(shù)后8周,B、C兩組骨放射學(xué)評(píng)分高于A組(PA-B=0.001,PA-C<0.001),C組放射學(xué)評(píng)分與B組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(PB-C=0.827),B、C兩組新生骨痂百分比高于A組(PA-B=