IL-23在CIA大鼠關(guān)節(jié)滑膜中的表達(dá)及藥物的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　 檢測白細(xì)胞介素-23(IL-23)在膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(CIA)大鼠血清中的濃度及關(guān)節(jié)滑膜中的表達(dá)，并觀察來氟米特干預(yù)后上述指標(biāo)的變化情況，初步探討IL-23在大鼠CIA發(fā)生、發(fā)展中的可能作用及來氟米特對(duì)CIA大鼠IL-23表達(dá)的影響。
　　 方法：
　　 將50只雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白組和造模組，空白組10只，造模組40只；造模組大鼠尾根部皮下注射膠原乳劑(0.5ml/只)，一周后等量乳劑相同方法加

2、強(qiáng)免疫以誘導(dǎo)CIA模型，空白組相同時(shí)間、相同部位注射等體積生理鹽水；造模后4周(即給藥前)對(duì)造模組大鼠進(jìn)行關(guān)節(jié)炎評(píng)分，記錄AI值。選擇20只CIA誘導(dǎo)成功(AI≥6分)大鼠隨機(jī)分為模型組和來氟米特組(LEF組)，每組10只；LEF組每天給予米氟米特(5mg/(kg·d)灌胃，空白組及模型組給予等量生理鹽水灌胃，持續(xù)三周；給藥前及給藥后1、2、3周分別記錄各組大鼠體重、足爪容積及模型組與LEF組大鼠的AI值；給藥前及給藥后1、2、3周分別

3、自尾靜脈留取各組大鼠靜脈血，以ELISA的方法檢測血清IL-23的濃度；給藥后3周處死大鼠留取雙側(cè)膝關(guān)節(jié)滑膜，福爾馬林液中浸泡兩天后石蠟包埋，切片行HE染色觀察病理改變并進(jìn)行評(píng)分，另切片進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色觀察IL-23的表達(dá)情況并進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果：
　　 (1)造模組大鼠于造模后1周開始出現(xiàn)關(guān)節(jié)及足爪腫脹并逐漸加重，造模后2周腫脹明顯，造模后4周少數(shù)大鼠出現(xiàn)關(guān)節(jié)強(qiáng)直、足爪攣縮。造模前各組大鼠體重、足爪容積無

4、差異(P＞O.05)；造模后4周，造模組大鼠體重較空白組明顯降低(P＜O.01)，足爪容積較空白組明顯增加(P＜O.01)，關(guān)節(jié)炎評(píng)分顯示共有27只大鼠AI值≥6分。
　　 (2)給藥前，LEF組大鼠體重、足爪容積與模型組之間無差異(P＞0.05)，與空白組之間差異顯著(P＜0.01)；AI值與模型組之間無顯著差異(P＞0.05)。給藥后3周，LEF組大鼠體重較模型組明顯增加(P＜0.01)，但仍明顯低于空白組(P＜0.01)；

5、足爪容積明顯小于模型組(P＜0.01)，與空白組之間差異不顯著(P＞O.05)；AI值較模型組明顯減小(P＜0.O1)。
　　 (3)給藥前，模型組及LEF組大鼠血清IL-23濃度較空白組明顯增高(P＜O.O1)；給藥后3周，LEF組血清IL-23濃度較模型組明顯減低(P＜0.01)，但仍明顯高于空白組(P＜0.01)。
　　 (4)關(guān)節(jié)滑膜HE染色顯示空白組大鼠關(guān)節(jié)滑膜無明顯增生，滑膜下僅見少量炎性細(xì)胞；模型組大鼠滑膜

6、增厚，大量炎性細(xì)胞浸潤，有血管翳及新生血管生成；LEF組大鼠滑膜增生、炎性細(xì)胞浸潤及血管生成均較模型組減輕。病理學(xué)評(píng)分顯示模型組及LEF組關(guān)節(jié)滑膜病理積分較空白組明顯增高(P＜0.01)，LEF組病理積分較模型組明顯降低(P＜0.01)。
　　 (5)關(guān)節(jié)滑膜免疫組織化學(xué)染色顯示空白組大鼠滑膜層僅見少量IL-23陽性表達(dá)；模型組大鼠滑膜層及滑膜下組織中均可見較多IL-23陽性表達(dá)；LEF組滑膜及滑膜下IL-23陽性表達(dá)較模型組減

7、少。免疫組織化學(xué)半定量分析顯示模型組及LEF組關(guān)節(jié)滑膜IL-23表達(dá)的相對(duì)光密度比值較空白組明顯增加(P＜0.01)，LEF組較模型組明顯減少(P＜0.O1)。
　　 結(jié)論：CIA大鼠血清IL-23濃度及關(guān)節(jié)滑膜IL-23的表達(dá)較正常大鼠明顯增高，提示IL-23可能是大鼠CIA發(fā)生、發(fā)展中的促炎因子之一；來氟米特干預(yù)可以緩解CIA大鼠關(guān)節(jié)腫脹程度，并降低血清IL-23濃度及關(guān)節(jié)滑膜IL-23的表達(dá)，提示來氟米特在緩解CIA大鼠炎