脂氧素A4對(duì)肝癌細(xì)胞糖代謝的影響.pdf

1、目的：
　　脂氧素(Lipoxin,LXs)是一類具有抗炎和促進(jìn)炎癥消退功能的脂類。本課題組先前研究發(fā)現(xiàn)LXA4能在整體和離體水平抑制肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移和血管新生，并且降低缺氧誘導(dǎo)因子1(Hypoxia inducible factor-1,HIF-1)的表達(dá)。HIF-1是機(jī)體參與缺氧調(diào)節(jié)的重要轉(zhuǎn)錄因子，在腫瘤的糖代謝中亦扮演了重要的角色。氧化磷酸化和糖酵解失衡所致的代謝程序重排是腫瘤的重要代謝特征之一。實(shí)體腫瘤中的缺氧微環(huán)境可

2、以引起代謝程序重排。本研究主要從整體和離體水平觀察了LXA4對(duì)肝癌糖代謝的影響。
　　方法：
　　離體實(shí)驗(yàn)：
　　HepG2人肝癌細(xì)胞株，分別進(jìn)行常氧培養(yǎng)和缺氧24小時(shí)培養(yǎng)。常氧狀態(tài)下細(xì)胞分為對(duì)照組、LXA4組(200nM)、LPS組(100ug/L)，LPS+LXA4組。缺氧狀態(tài)下細(xì)胞分為對(duì)照組和LXA4組(10-200nM)。
　　采用逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(Glucose transporter

3、-1,GLUT1)，己糖激酶-2(Hexokinase-2,HK2)，丙酮酸脫氫酶激酶-1(Pyruvate dehydrogenase kinase-1,PDK1)，轉(zhuǎn)醛醇酶(Transaldolase,TAL)，轉(zhuǎn)酮醇酶樣蛋白-1(Transketolase like protein-1,TKTL1)的mRNA表達(dá)水平。
　　整體實(shí)驗(yàn)：
　　雄性昆明小鼠，4-6周齡、體重18-20g，腹腔注射對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的H22細(xì)胞2×1

4、06個(gè)，7-10天后抽取小鼠肝癌細(xì)胞腹水，稀釋成2×105/50ul。雌性BABL/c小鼠，6-7周齡、體重18-20g，采用上述腹水培養(yǎng)的H22細(xì)胞進(jìn)行右側(cè)背部皮下注射，建立皮下荷瘤小鼠模型。
　　小鼠隨機(jī)分為模型組(皮下注射H22細(xì)胞懸浮液后每48h腹腔注射生理鹽水5ml/kg直到第14天)，LXA4組(皮下注射H22細(xì)胞懸浮液后每48h腹腔注射LXA4直到第14天)。
　　隔天測(cè)量小鼠腫瘤大小，F(xiàn)DG-PET法檢測(cè)腫瘤

5、的葡萄糖攝取，逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測(cè)腫瘤組織GLUT1的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　細(xì)胞水平，常氧下LPS對(duì)HepG2細(xì)胞GLUT1、HK2和TKTL1的mRNA表達(dá)沒(méi)有明顯作用；然而，LXA4顯著抑制了HepG2細(xì)胞的GLUT1、HK2和TKTL1的mRNA表達(dá)，但是對(duì)PDK1和TAL的mRNA表達(dá)沒(méi)有明顯影響。缺氧24小時(shí)條件下，LXA4能顯著下調(diào)HepG2細(xì)胞GLUT1和HK2的mRNA表達(dá)，對(duì)PDK1的mRNA表達(dá)無(wú)