獨活寄生湯對Hartley豚鼠椎間盤退變干預的研究.pdf

1、研究背景：
　　 由椎間盤退變(Intervertebral disc degeneration,IVDD)造成的頸、腰椎疾病日益構成對人民健康的威脅,并嚴重影響患者生活質(zhì)量。IVDD是一個漫長而不可逆的過程,因此,IVDD機制的研究,對于從根本上防止頸、腰椎疾病的發(fā)生具有重要意義。從不同角度對IVDD機制的研究一直是國內(nèi)外學者研究的熱點。每一個對IVDD機制的新認識,都是開發(fā)治療IVDD新途徑的前提和基礎。
　　 動物

2、模型是研究IVDD發(fā)生機制和檢測各種治療有效性的一種可靠手段,建立一種可靠的IVDD動物模型將為研究IVDD發(fā)病機制提供有利的條件,同時為修復退變椎間盤的各種治療探索研究提供良好的實驗載體。
　　 中醫(yī)藥在治療IVDD方面已經(jīng)體現(xiàn)出了優(yōu)勢,因此是否可以應用現(xiàn)代技術手段通過中藥對IVDD作用機理進行研究是一個值得深入探討的問題,展開中醫(yī)藥防治IVDD的實驗研究,為深化中醫(yī)藥延緩IvDD研究奠定更加堅實的基礎。
　　 本實驗

3、旨在通過獨活寄生湯對預防雌性Hartley豚鼠自然增齡過程中IVDD的干預作用,進行從分子生物學水平的相關機理的探索,從現(xiàn)代醫(yī)學角度為中醫(yī)藥預防IVDD提供更為科學的理論和實驗依據(jù)。
　　 研究目的：
　　 本實驗通過對雌性Hartley豚鼠腰椎間盤自然老化退變的模型,觀察各月齡組豚鼠腰椎間盤的形態(tài)學變化、血生化變化,建立一種可靠的腰IVDD動物模型。利用該模型觀察獨活寄生湯對椎間盤髓核金屬蛋白酶及其炎性誘導因子和蛋白多

4、糖(proteoglycan,PG)降解的影響,初步探討獨活寄生湯對Hartley豚鼠IVDD的作用機理。
　　 研究方法：
　　 選用1月齡雌性Hartley豚鼠104只,按月齡隨機分為正常組、模型組、治療組(獨活寄生湯)、陽性對照組(鹽酸氨基葡萄糖膠囊)4組,每組8只。取腰椎間盤L4—5進行HE、番紅-0/固綠、Mallory染色,觀察椎間盤髓核形態(tài)學變化,檢測各組標本血清中PG含量的變化。免疫組織化學染色檢測椎間盤

5、髓核中IL-1β、TNF-α、MMP-1、MMP-3表達的OD值變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.組織形態(tài)學:從HE、番紅-0/固綠及Mallory染色染色標本觀察,隨月齡增長形態(tài)變化明顯。與正常組比較,模型組椎間盤脊索細胞數(shù)目明顯減少,髓核向心性皺縮、纖維軟骨化,軟骨終板變薄。
　　 2.血生化水平:血清PG Elisa檢測結(jié)果顯示模型組血清PG含量隨年齡的增長而下降,且不同月齡組間差異顯著。治療組和陽性對照組血

6、清PG下降程度較模型組輕,尤以治療組血清PG含量最高。
　　 3.分子水平:通過免疫組織化學染色的方法,觀察基質(zhì)金屬蛋白酶MMP—1、MMP-3及其誘導因子IL—1β、TNF-α在退變椎間盤組織中的表達及變化,可見隨年齡的增長而下降,不同月齡組間差異顯著,模型組、中藥組、西藥組的表達均較正常組模型升高有顯著性差異,且模型組更為明顯。
　　 結(jié)論：
　　 1利用雌性Hartley豚鼠自然老化退變模型,可以觀察到椎間