白毛藤制劑對大鼠創(chuàng)傷愈合細(xì)胞凋亡及基因表達(dá)研究.pdf

1、創(chuàng)傷愈合中的細(xì)胞凋亡現(xiàn)象是近年來在傷口愈合機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)并逐漸引起人們關(guān)注的一個熱點(diǎn)，這不僅是因?yàn)榧?xì)胞凋亡參與了正常傷口愈合組織重建的過程，而且在異常的傷口愈合，如增生性瘢痕、瘢痕疙瘩以及放射復(fù)合傷口愈合延遲等過程中也具有重要作用。為此我們進(jìn)行本研究。 本實(shí)驗(yàn)以大白鼠皮膚為動物模型。SPF昆系大鼠32只，隨機(jī)選取24只進(jìn)行手術(shù)，其余8只備用，用特制取皮器制作直徑為lcm的圓盤皮膚傷口，于左側(cè)一個傷口為對照組，右側(cè)兩個傷口為實(shí)驗(yàn)組

2、。實(shí)驗(yàn)組用白毛藤敷料進(jìn)行處理，對照組單純敷以無菌敷料。分別于傷后5h，1d，3d，5d，7d，10d，15d，20d共8個時相點(diǎn)各取3只創(chuàng)傷組鼠和1只正常鼠行頸椎脫位處死，取其創(chuàng)面組織及正常大鼠皮膚組織。提取皮膚細(xì)胞凋亡DNA，用瓊脂糖凝膠電泳檢測其凋亡特征性梯狀帶。取創(chuàng)面及正常皮膚組織制成石蠟切片，進(jìn)行TUNEL和免疫組化染色，觀察凋亡及基因表達(dá)情況。其余大鼠不取材，在一定時間點(diǎn)測量未愈合的殘留創(chuàng)面面積及相觀血液學(xué)及酶學(xué)檢查，并進(jìn)行比

3、較。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：白毛藤實(shí)驗(yàn)組其創(chuàng)傷面積及傷腔容積要比對照組快，說明傷口愈合速度快于對照組。用瓊脂糧凝膠電泳可檢測到凋亡特征性梯狀帶，TUNEL檢測可觀察到凋亡細(xì)胞的陽性表達(dá)且呈一定規(guī)律性，并且實(shí)驗(yàn)組和對照組存在著一定的差異。免疫組化檢測觀察可觀察到Bcl-2和caspase-3基因的陽性表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)論：白毛藤復(fù)方劑在促進(jìn)創(chuàng)傷愈合方面有一定的作用；在大鼠皮膚創(chuàng)傷愈合過程中有細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，并呈一定的規(guī)律性；bcl-2與