TGC-32在兒童IgA腎病腎組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、[目的]:
　　IgA腎病(IgANephropathy,IgAN)是兒童常見的原發(fā)性腎小球疾病之一,臨床上主要表現(xiàn)為血尿或/和蛋白尿,并呈慢性進(jìn)展性過程;病理特征為以IgA為主的免疫復(fù)合物在腎小球系膜區(qū)沉積所致的系膜增生性免疫性腎小球炎癥;其確切發(fā)病機制目前尚未完全清楚。業(yè)已明確,除腎小球病變外,腎小管問質(zhì)損傷程度也是影響IgAN進(jìn)展和預(yù)后的主要因素之一。其中腎小管上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchyma

2、lTransition,EMT)作為腎小管間質(zhì)損傷的主要細(xì)胞行為參與了IgAN的發(fā)生發(fā)展過程。近來發(fā)現(xiàn)補體應(yīng)答基因-32(ResponseGenetoComplement-32,RGC-32)是膜攻擊復(fù)合物(C5b-9)介導(dǎo)細(xì)胞增殖及炎癥反應(yīng)的下游關(guān)鍵調(diào)控因子而參與炎癥反應(yīng);Huang等體外實驗也發(fā)現(xiàn)RGC-32是轉(zhuǎn)化生長因子β(TransformingGrowthFactor-beta,TGF-β)誘導(dǎo)EMT信號通路下游關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子而

3、可能參與了腎間質(zhì)纖維化的發(fā)生。因此我們推測RGC-32可能參與IgAN急性或/和慢性進(jìn)展過程。但是RGC-32在正常以及腎小球腎炎腎組織中的表達(dá)及分布規(guī)律如何、與疾病的關(guān)系及其臨床意義等均未見報道。為此,本實驗旨在了解RGC-32在正常以及兒童IgAN腎組織中表達(dá)及其可能的臨床意義。
　　[方法]:
　　采用免疫組織化學(xué)方法觀察正常腎組織以及兒童IgAN腎組織中RGC-32蛋白的表達(dá)與分布,同時觀察α-平滑肌肌動蛋白(α-S

4、moothMuscleActin,α-SMA)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TransformingGrowthFactor-β1,TGF-β1)的表達(dá)與分布。按照腎組織病理損傷評分,將45例兒章IgAN分為三個亞組即輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組。采用單因素方差分析對RGC-32、α-SMA、TGF-β1的表達(dá)進(jìn)行組間比較分析;對各組問臨床指標(biāo)分析采用KruskalWallisH秩和檢驗;同時采用Spearman相關(guān)分析法對RGC-32、

5、α-SMA、TGF-β1在IgAN腎組織中的表達(dá)、IgAN腎組織病理損傷程度、臨床指標(biāo)如血清肌酐(SerumCreatinine,Scr)、尿微量蛋白系列[包括尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶/肌酐N-acetyl-β-D-glucosamccharase/Creatinine,NAG/Cr)、尿微量白蛋白/肌酐(Microalbuminuria/Creatinine,Albu/Cr)、尿微量免疫球蛋白G/肌酐(UrinaryMicro-

6、immunoglobulin/Creatinine,IgGu/Cr)、尿αl一微球蛋白/肌酐(Urinaryα1-microglobulin/Creatinine,α1-Mu/Cr]的關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　[結(jié)果]:
　　1.RGC-32蛋白在正常腎組織的所有腎小管(近端腎小管、遠(yuǎn)端腎小管及集合管)均明顯表達(dá),且主要分布于腎小管上皮細(xì)胞胞漿及核周;RGC-32蛋白在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管未見表達(dá)。
　　2.RG

7、C-32在兒童IgAN腎組織中的表達(dá)及意義:(1)RGC-32蛋白在IgAN腎組織中表達(dá)于所有腎小管上皮細(xì)胞,在腎小球、。腎小管間質(zhì)及腎血管中未見表達(dá)。(2)RGC-32在正常腎組織、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組中的陽性表達(dá)指數(shù)分別為18.29±6.22％、23.90±9.65％、31.23±9·86％、34.52±10.63％。RGC-32在IgAN重度損傷組的陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=10.62,P＜0.01)及

8、正常腎組織(F=16.23,P＜0.01),與中度損傷組差異無顯著性(F=3.29,P＞0.05);中度損傷組RGC-32陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.33,P＜0.05)及正常腎組織(F=12.94,P＜0.05);輕度損傷組與正常腎組織RGC-32陽性表達(dá)指數(shù)比較差異無顯著性(F=5.61,P＞0.05)。(3)RGC-32在IgAN腎組織中的陽性表達(dá)指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0.382,P＜0.01)

9、。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度的加重,RGC-32在腎小管的表達(dá)逐漸增強。提示RGC-32表達(dá)水平與IgAN病理損傷程度有關(guān)。
　　3.RGC-32與α-SMA表達(dá)的關(guān)系:(1)α-SMA蛋白在正常腎組織中主要表達(dá)于腎血管平滑肌,在腎小球、腎小管及腎小管間質(zhì)未見表達(dá);在IgAN腎組織中,α-SMA蛋白除在腎血管表達(dá)外,在腎小球、腎小管間質(zhì)有不同程度的表達(dá),在腎小管未見表達(dá)。(2)α-SMA蛋白在正常腎組織、IgAN輕度損傷組

10、、中度損傷組及重度損傷組的腎小管間質(zhì)的陽性表達(dá)指數(shù)分別為11.58±6.78％、14.59±6.78％、22.34±12.16％、28.68±9.51％。Α-SMA在IgAN重度損傷組的陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=14.08,P＜0.01)及正常腎組織(F=17.10,P＜0.01),但與中度損傷組比較差異無顯著性(F=6.34,P＞0.05);中度損傷組α-SMA陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.75,P＜0.05)及正常腎組織

11、(F=10.76,P＜0.05);輕度損傷組與正常腎組織α-SMA陽性表達(dá)指數(shù)比較無顯著差異(F=3.02,P＞0.05);α-SMA在IgAN腎組織中的陽性表達(dá)指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0.476,P＜0.01)。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度加重,α-SMA在腎小管問質(zhì)的表達(dá)逐漸增強。(3)在IgAN腎組織中,RGC-32與α-SMA的陽性表達(dá)指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.594,P＜0.01)。
　　4.

12、RGC-32與TGF-β1表達(dá)的關(guān)系:(1)TGF-β1蛋白在正常及l(fā)gAN腎組織中表達(dá)于所有腎小管上皮細(xì)胞,在腎小球、腎小管間質(zhì)及腎血管未見表達(dá):與RGC-32蛋白分布規(guī)律一致。(2)TGF-β1在正常腎組織、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及重度損傷組的陽性表達(dá)指數(shù)分別為12.89±9.12％、18.45±6.31％、25.75±10.31％、29.22±10.27％。TGF-β1在IgAN重度損傷組的陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=

13、10.77,P＜0.01)及正常腎組織(F=16.33,P＜0.01),與中度損傷組相比差異無顯著性(F=3.48,P＞0.05);中度損傷組TGF-β1陽性表達(dá)指數(shù)大于輕度損傷組(F=7.29,P＜0.05)及正常腎組織(F=12.85,P＜0.05);輕度損傷組與正常腎組織TGF-βl陽性表達(dá)指數(shù)比較無顯著差異(F=5.56,P＞0.05)。TGF-β1在IgAN腎組織中的陽性表達(dá)指數(shù)與兒童IgAN腎組織病理損傷評分呈正相關(guān)(r=0

14、.482,P＜0.01)。表明隨著IgAN腎組織病理損傷程度加重,TGF-β1在腎小管中的表達(dá)逐漸增強。(3)在IgAN腎組織中,RGC-32與TGF-β1的陽性表達(dá)指數(shù)呈正相關(guān)(r=0.521,P＜0.01)。(4)TGF-β1在IgAN腎組織中的陽性表達(dá)指數(shù)與α-SMA的陽性表達(dá)指數(shù)亦呈正相關(guān)(r=0.435,P＜0.01)。
　　5.RGC-32表達(dá)與IgAN臨床相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系:(1)對照組、IgAN輕度損傷組、中度損傷組及

15、重度損傷組之間的臨床指標(biāo)Scr、尿NAG/Cr、Albu/Cr、IgGu/Cr、αl-Mu/Cr差異無顯著性(H=7.142、4.829、4.589、4.120、3.755,P＞0.05)。(2)IgAN腎組織中RGC-32陽性表達(dá)指數(shù)與Scr、尿NAG/Cr、Albu/Cr、IgGu/Cr、α1-Mu/Cr均無相關(guān)性(r=0.117、.-0.115、.-0.138、.-0.176、-0.028,P均＞0.05)。提示RGC-32表達(dá)與