復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病治療前后主要病原菌基因變異的實驗研究.pdf

1、外陰陰道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis，VVC)是一種婦女常見的炎性疾病，以育齡婦女多見。有文獻(xiàn)報道大約75％的婦女至少有過一次急性感染，10％的婦女有反復(fù)發(fā)作。VVC的發(fā)病率在全球有明顯上升的趨勢[1]。長期以來一直困擾廣大的婦女，對婦女的身心健康造成了很大的影響。復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病(recurrent vulvovaginal candidiasis,RVVC)的病因十分復(fù)雜，一般認(rèn)為,導(dǎo)致復(fù)發(fā)的因素

2、主要涉及臨床因素、宿主局部免疫力以及念珠菌的細(xì)胞分子機(jī)制等方面[2]。臨床因素和陰道局部免疫力低下,導(dǎo)致陰道菌群失調(diào)即陰道局部微生態(tài)平衡破壞，致外陰陰道念珠菌病的復(fù)發(fā)。RVVC的治療效果不是很理想，在治療上的難點可能是病原菌產(chǎn)生耐藥或者其基因組發(fā)生變異，因此非常有必要從病原菌的分子水平上對其發(fā)病的機(jī)制進(jìn)行研究，本課題主要研究RVVC在治療前后主要病原菌的基因組是否有變化。 一、復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病的主要病原菌RAPD 分析

3、 目的：對復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病復(fù)發(fā)患者真菌感染的主要病原菌進(jìn)行研究。 方法：用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA分析技術(shù)對復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病復(fù)發(fā)患者的主要病原菌基因進(jìn)行分析。 結(jié)果：引物1對實驗組（A組、B組）和與對照組（C組）在800bp條帶處擴(kuò)增條帶的數(shù)量和擴(kuò)增片斷的大小，三組間比較有差異，但是，沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。而引物1在1050bp出現(xiàn)的陽性率比較有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其中B組條帶出現(xiàn)的陽性率明

4、顯高于A組和C組；引物2在800bp和1050bp擴(kuò)增條帶數(shù)量和擴(kuò)增片斷的大小有差異，同一擴(kuò)增條帶三組出現(xiàn)的陽性率亦不同，但均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 結(jié)論：在致病過程中白念珠菌的基因基本是穩(wěn)定的。 二、復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌病患者真菌感染主要病原菌的FCM分析 目的：在細(xì)胞生物學(xué)水平對外陰陰道念株菌病患者深部真菌感染的主要病原菌進(jìn)行研究，以探討外陰陰道念株菌病患者深部真菌感染發(fā)生發(fā)展過程中病原菌的變化及其與

5、發(fā)病的關(guān)系。 方法：采用流式細(xì)胞技術(shù)(flow cytometry，F(xiàn)CM)對復(fù)發(fā)性外陰陰道念株菌病患者深部真菌感染的主要病原菌白念珠菌和對照組白念珠菌細(xì)胞總DNA含量、增殖指數(shù)(PI)及細(xì)胞周期進(jìn)行測量。 結(jié)果：三組穩(wěn)定生長階段的白念珠菌細(xì)胞絕大多數(shù)處于G0/G1期,A、B組細(xì)胞在G0/G1期的構(gòu)成比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),A、B組顯著高于C組，A、B組間差異無顯著差異。在G2/M期B組較A,C組有顯著差異（