維生素A和布地奈德對(duì)持續(xù)性哮喘大鼠細(xì)胞免疫功能的影響.pdf

1、目的：通過(guò)建立持續(xù)性哮喘大鼠模型，以維生素A和布地奈德作為干預(yù)因素，比較哮喘大鼠血T細(xì)胞亞群和CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(CD4+CD25+regulatory Tcell，CD4+CD25+Treg)、血清細(xì)胞因子IL-4、IL-10和IFN-γ的變化以及肺組織和脾臟的病理改變，從而為維生素A在支氣管哮喘中的防治提供理論根據(jù)。 方法：將42只成年雌性SD大鼠于實(shí)驗(yàn)第1天和7天兩次腹腔注射致敏液1.0ml/只/次(0.08％

2、OVA和液態(tài)鋁混合液)。實(shí)驗(yàn)第14天，大鼠霧化吸入1％OVA溶液進(jìn)行激發(fā)，每日一次，每次30分鐘，于激發(fā)后第3周，42只大鼠隨機(jī)分成A、B、C三組，A組為布地奈德組，B組為維生素A組，C組為哮喘組，每組各14只。A、B、C三組大鼠分別干預(yù)如下：每天上午照常給予1％OVA霧化進(jìn)行激發(fā)，隔天下午A組霧化0.02％布地奈德生理鹽水溶液，B組霧化維生素A 1250 U/ml(90％乙醇為溶媒)，C組霧化90％酒精，各組每次霧化均30分鐘，共3次

3、。三組均隔日給藥，干預(yù)共1周。于激發(fā)后第4周和第5周分兩批取材，每組7只/批/次，外周靜脈采血從眶靜脈叢取血50μl，以流式細(xì)胞儀進(jìn)行T細(xì)胞亞群檢測(cè)，隨后處死大鼠，取心臟血以ELISA法進(jìn)行IL-4、IL-10和IFN-γ檢測(cè)，取肺組織和脾臟進(jìn)行病理觀測(cè)。 結(jié)果：(1)T細(xì)胞亞群和CD4+CD25+Treg檢測(cè)結(jié)果：激發(fā)后第4周和第5周：維生素A組CD3+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞和CD4/CD8、顯著高于哮喘組和布地奈德組。維生素

4、A組CD4+CD25+Treg高于布地奈德組，低于哮喘組，三組間無(wú)顯著性差異。(2)細(xì)胞因子檢測(cè)結(jié)果：激發(fā)后第4周：三組間血清IFN-γ、IL-4和IL-10水平均無(wú)顯著性差異。激發(fā)后第5周：維生素A組IL-4、IFN-γ水平與哮喘組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，維生素A組IL-10水平顯著低于哮喘組、高于布地奈德組；布地奈德組IL-4水平顯著低于哮喘組。(3)肺組織病理檢查：布地奈德組：激發(fā)后第4周肺內(nèi)氣道上皮中杯狀細(xì)胞增多，周圍間質(zhì)中淋巴細(xì)

5、胞浸潤(rùn)較少。激發(fā)后第5周：肺內(nèi)氣道上皮中杯狀細(xì)胞明顯增多，周圍間質(zhì)淋巴細(xì)胞重度浸潤(rùn)，肺泡隔增寬明顯，肺泡腔有淋巴細(xì)胞和紅細(xì)胞滲出。維生素A組：激發(fā)后第4周：肺氣道杯狀細(xì)胞輕度增多，上皮成片脫落，間質(zhì)淋巴細(xì)胞重度浸潤(rùn)，肺泡隔明顯增寬。激發(fā)后第5周：肺內(nèi)氣道上皮細(xì)胞恢復(fù)，基底層細(xì)胞完整，杯狀細(xì)胞明顯減少，周圍間質(zhì)淋巴細(xì)胞重度浸潤(rùn)，肺泡隔輕度增寬，肺泡腔內(nèi)有淋巴細(xì)胞滲出。哮喘組：激發(fā)后第4周：肺內(nèi)氣道上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞增多，周圍間質(zhì)中淋巴細(xì)胞中-

6、重度浸潤(rùn)，肺泡隔明顯增寬。激發(fā)后第5周：肺氣道杯狀細(xì)胞仍較多，肺間質(zhì)淋巴細(xì)胞重度浸潤(rùn)，肺泡隔增寬程度有所減輕。 結(jié)論：(1)霧化維生素A可以使哮喘大鼠血清CD3+、CD4+T細(xì)胞升高，CD4/CD8比值升高，CD8+T細(xì)胞降低。(2)霧化維生素A可以使哮喘大鼠血清細(xì)胞因子IL-4和IL-10降低。(3)霧化高劑量維生素A后第4周增加脾臟淋巴細(xì)胞增生，肺淋巴細(xì)胞的浸潤(rùn)，杯狀細(xì)胞增生，對(duì)肺氣道上皮有毒性作用。激發(fā)后第5周肺部炎癥消散