大劑量維生素E補充對大鼠抗氧化能力和細(xì)胞功能影響的實驗研究.pdf

1、目的：通過補充不同劑量的維生素E，研究大劑量維生素E對大鼠抗氧化能力和細(xì)胞功能的影響。
　　 方法：取50只初斷乳Wistar大鼠，雌雄各半，將大鼠隨機分為對照組、VE1、VE2、VE3、VE4五組，五組大鼠每天給予不同劑量的維生素E灌胃，劑量分別為7.5 mg/kg、15mg/kg、50mg/kg、200mg/kg、750mg/kg，實驗周期為8周。實驗結(jié)束后處死動物并留取全血，分離血漿，同時制備紅細(xì)胞膜，進行抗氧化能力和細(xì)胞

2、功能的分析?？寡趸芰Ψ治霭ㄑ獫{超氧化物歧化酶(SOD)活性測定、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性測定、丙二醛(MDA)含量分析及DNA氧化損傷。SOD、GSH-Px及MDA用生化試劑盒測定，DNA氧化損傷采用“彗星”電泳技術(shù)進行分析。細(xì)胞功能分析包括外周血淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率測定和紅細(xì)胞膜流動性測定。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率測定應(yīng)用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法，紅細(xì)胞膜流動性測定采用熒光偏振法。
　　 結(jié)果：
　　 1、抗氧

3、化能力分析結(jié)果顯示：當(dāng)維生素E劑量為50mg/kg時，與對照組相比，大鼠血漿維生素E濃度提高了75.6％，SOD活性顯著升高(P<0.01)，提高了14.9％，血漿和紅細(xì)胞膜中GSH-Px活性均明顯升高(P<0.05，P<0.01)，分別提高了8.4％和51.1％，血漿和紅細(xì)胞膜MDA水平均明顯降低(P<0.01，P<0.01)，分別比對照組下降了57％和47.2％。DNA氧化損傷分析結(jié)果顯示當(dāng)H2O2濃度為10μ mol/1時，50m

4、g/kg VE組的DNA氧化損傷較對照組顯著降低(P<0.05)。當(dāng)維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時，與對照組相比，大鼠血漿維生素E水平分別提高了95.8％、117.5％，SOD活性明顯下降(P<0.05)，而GSH-Px活性、MDA含量改善不明顯；與50 mg/kgVE組相比，SOD活性明顯下降(P<0.05)，血漿和紅細(xì)胞膜GSH-Px活性均明顯降低(P<0.05)，血漿和紅細(xì)胞膜MDA水平明顯升高(P<0.0

5、5)。DNA氧化損傷分析結(jié)果顯示當(dāng)H2O2濃度為10μ mol/1時，200mg/kgVE組、750mg/kgVE組的DNA氧化損傷較對照組均顯著加重(P<0.01，P<0.01)。以上結(jié)果表明，當(dāng)外界損傷因素作用于機體時，大劑量維生素E不僅沒有降低DNA氧化損傷，而且還使DNA氧化損傷加重，導(dǎo)致機體遺傳穩(wěn)定性受到破壞。
　　 2、細(xì)胞功能分析結(jié)果顯示：當(dāng)維生素E劑量為50mg/kg時，大鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和紅細(xì)胞膜流動性均比對照

6、組明顯提高(P<0.05，P<0.01)，當(dāng)維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時，補充200mg/kgVE對細(xì)胞轉(zhuǎn)化率沒產(chǎn)生影響(P>0.05)，細(xì)胞增殖功能無明顯變化，當(dāng)補充劑量增加為750mg/kg時，與對照組相比，大鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率顯著降低(p<0.05)。這兩個大劑量維生素E補充組對紅細(xì)胞膜流動性均未見明顯改善。
　　 結(jié)論：
　　 1、當(dāng)維生素E補充劑量為50mg/kg時，機體SOD、GSH-

7、Px等抗氧化酶活性增強，血漿MDA水平降低；同時，過氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷水平降低；大鼠紅細(xì)胞膜流動性和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率提高。
　　 2、當(dāng)維生素E補充劑量為200mg/kg、750mg/kg時，血漿SOD活性降低，過氧化氫誘發(fā)的DNA氧化損傷加重；750mg/kg VE使淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率降低。而GSH-Px、MDA、紅細(xì)胞膜流動性等在這兩個大劑量補充組均未見明顯改善。
　　 綜上，當(dāng)維生素E補充劑量為50mg/kg時，