大劑量維生素D3補(bǔ)充對(duì)糖尿病大鼠糖脂代謝和DNA損傷的影響.pdf

1、目的：糖尿病（DM）是一組以長(zhǎng)期高血糖為主要標(biāo)志的慢性代謝性疾病，發(fā)病率逐年升高，久病患者可能會(huì)出現(xiàn)糖脂代謝紊亂和遺傳物質(zhì)穩(wěn)定性降低等并發(fā)癥。近年來，維生素D（VD）除了傳統(tǒng)的調(diào)節(jié)鈣磷代謝等作用外，對(duì)DM的影響也得到了越來越多的關(guān)注，主要表現(xiàn)在調(diào)控胰島素敏感性、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力及降低氧化應(yīng)激等方面。本研究旨在觀察大劑量VD3補(bǔ)充對(duì)DM大鼠糖脂代謝的影響，并研究其對(duì)DM大鼠外周血淋巴細(xì)胞DNA氧化損傷、大鼠骨髓微核率（MNR）及淋巴細(xì)胞增

2、殖活性有無影響，并探討大劑量VD補(bǔ)充對(duì)DM大鼠有無毒副作用。
　　方法：用高糖高脂喂養(yǎng)結(jié)合空腹腹腔注射鏈脲佐菌素（STZ）的方法制備DM大鼠模型。造模成功后隨機(jī)分為6組并給予不同濃度的VD3連續(xù)灌胃6周，其中N組和DM組分別為對(duì)照組和DM模型組，灌胃生理劑量的VD3（36IU/kg），5VD、25VD、125VD和200VD組分別灌胃5倍、25倍、125倍和200倍生理劑量的VD3，劑量分別為：180IU/kg、900IU/kg、

3、4500IU/kg、7200IU/kg。連續(xù)灌胃6周后麻醉處死大鼠，留取胰腺、脾臟和肌肉等組織準(zhǔn)確稱重，計(jì)算臟器指數(shù)，并制備大鼠胰腺和肌肉病理切片。血清25(OH)D和胰島素采用放射免疫法檢測(cè)，血脂和肝功能采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)。單細(xì)胞凝膠電泳法檢測(cè)大鼠外周血淋巴細(xì)胞DNA氧化損傷，骨髓微核實(shí)驗(yàn)25用來檢測(cè)大鼠骨髓MNR，MTT法檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖活性。
　　結(jié)果：VD3補(bǔ)充顯著提高了大鼠血清25(OH)D水平，且呈劑量-效應(yīng)關(guān)系

4、（p<0.05），干預(yù)后5VD、25VD和125VD組胰島素水平明顯增高。血脂檢測(cè)顯示高密度脂蛋白（HDL-C）在5VD、25VD和125VD組高于N組（p<0.05），而膽固醇（TC）和低密度脂蛋白（LDL-C）在各組之間沒有顯著差異。肝功能檢測(cè)顯示，25VD組可降低DM升高的谷丙轉(zhuǎn)氨酶，提示該劑量能夠調(diào)節(jié)DM大鼠的肝臟功能。大鼠胰腺和肌肉病理學(xué)切片顯示，VD3干預(yù)組組大鼠胰島細(xì)胞形態(tài)比DM組明顯好轉(zhuǎn)，胰島細(xì)胞數(shù)目增多，細(xì)胞體積比DM

5、組有不同程度的增大，VD干預(yù)組大鼠的肌肉形態(tài)也得到了較好的改善，肌細(xì)胞明顯增大，肌纖維束變厚，間隙變窄。VD3干預(yù)后各組間血糖如統(tǒng)計(jì)學(xué)差異但在數(shù)值上有下降的趨勢(shì)。單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)顯示，5VD和25VD干預(yù)組DNA自發(fā)損傷明顯低于DM組（p<0.05），125VD和200VD組未觀察到類似作用；各組間DNA誘導(dǎo)損傷未見顯著差異。骨髓微核試驗(yàn)顯示，DM組MNR較N組顯著增加，較DM組相比，5VD、25VD組和125VD組明顯降低且接近于正

6、常水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。大鼠外周血淋巴細(xì)胞增殖活性實(shí)驗(yàn)顯示，與N組比較，DM組淋巴細(xì)胞增殖活性明顯降低，5VD組和25VD組淋巴細(xì)胞增殖活性明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05），125VD組和200VD組未觀察到類似結(jié)果。200VD組血清鈣、磷含量明顯高于正常，甘油三酯（TG）及高密度脂蛋白明顯高于N組和DM組（p<0.05），且有升高M(jìn)NR的趨勢(shì)。
　　結(jié)論：適宜劑量范圍內(nèi)VD3補(bǔ)充對(duì)DM大鼠的體重和胰腺