鹽藻胞外多糖的分離與結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、從鹽藻培養(yǎng)液中提取出胞外多糖,并較為系統(tǒng)地研究了環(huán)境因素對鹽藻生長及其胞外多糖分泌量的影響.在發(fā)現(xiàn)鹽藻胞外多糖的抗氧化、促進(jìn)益生菌生長等生物藥理活性后,對鹽藻胞外多糖復(fù)合物進(jìn)行了分離純化,研究了分離所得的兩個(gè)多糖組分的部分理化性質(zhì)和初步結(jié)構(gòu). 采用超濾濃縮后無水乙醇沉淀法來提取鹽藻胞外多糖復(fù)合物,通過苯酚.硫酸法測定其糖含量,并利用單因子試驗(yàn)法和正交試驗(yàn)法分別考察了培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)基中幾種營養(yǎng)鹽(NaCl、KNO<,3>和.KH<

2、,2>PO<,4>)濃度和pH值等環(huán)境因素對鹽藻生長及其胞外多糖分泌量的影響.結(jié)果表明,在一定范圍內(nèi),隨著營養(yǎng)鹽濃度的提高和pH值的增大,鹽藻生長量逐漸升高,但是其胞外多糖分泌量表現(xiàn)出先增大后減少的現(xiàn)象,當(dāng)NaCl=0.8mol/L、KNO<,3>=800mg/L、KH<,2>PO<,4>=5mg/L和pH=8.5時(shí),胞外多糖的分泌量最大,可高達(dá)489mg/L. 利用NBT光還原法和甲基紫光度法分別考察了鹽藻胞外多糖體外抗氧化活

3、性,結(jié)果表明,胞外多糖對超氧陰離子自由基(O2<'->·)沒有抗性,對Fenton體系中產(chǎn)生的羥自由基(·OH)有較好的抑制作用.從藥物培菲康和酸奶中分離到乳酸菌屬的有益菌種,在其擴(kuò)大培養(yǎng)過程中用過濾滅菌的鹽藻胞外多糖溶液處理,確定了鹽藻胞外多糖能促進(jìn)益生菌的體外增殖和存活,且效果較顯著. 經(jīng)丙酮及無水乙醚洗滌脫脂和雙酶解除蛋白初步純化后,用DEAE-52陰離子交換柱層析分離純化鹽藻胞外多糖復(fù)合物,得到了兩個(gè)多糖組分EPS Ⅰ和

4、EPSⅡ,瓊脂糖凝膠電泳鑒定各自為均一的成分.對EPS Ⅰ和EPSⅡ進(jìn)行定性定量分析,結(jié)果糖含量以葡聚糖為對照時(shí)分別為61.34﹪和52.81﹪,蛋白含量3.97﹪和1.35﹪,且核酸含量小于0.025﹪,達(dá)到了比較高的純度.利用薄層層析和氣相色譜分析各組分的單糖組成,得到EPS Ⅰ由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖等六種中性多糖和半乳糖醛酸組成,EPSⅡ由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖等四種中性多糖和半乳糖醛酸組成.并對其