產(chǎn)胞外多糖乳酸菌的篩選及其多糖的結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、乳酸菌胞外多糖(exopolysaccharide, EPS）是乳酸菌在菌體生長、代謝過程中產(chǎn)生并分泌到細胞外、常常滲透到培養(yǎng)基中的莢膜多糖或粘液多糖。乳酸菌EPS不僅具有良好的流變學(xué)特性，還具有重要的生理活性，如抗氧化、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、益生作用等。我國擁有豐富的乳酸菌發(fā)酵食品，包括產(chǎn)胞外多糖在內(nèi)的乳酸菌資源尚未得到有效開發(fā)。本文對酸菜中產(chǎn)胞外多糖的乳酸菌進行高效快速地篩選，純化胞外多糖，對其結(jié)構(gòu)和理化特性進行研究。
　　以家庭

2、自制東北酸菜為樣品，采用產(chǎn)粘菌落法與多糖產(chǎn)量相結(jié)合的方法，篩選到兩株產(chǎn)EPS較高的菌株NM105和2-19，經(jīng)過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化和16S rDNA手段對這兩株菌進行了系統(tǒng)鑒定，判定這兩株菌均屬于明串珠菌屬，分別命名為Leuconosto citreum NM105和L.mesenteroides subsp.dextranicum2-19。
　　將兩株菌分別接種至含5％蔗糖的MRS培養(yǎng)基中，25℃培養(yǎng)48 h，得到產(chǎn)EPS的發(fā)

3、酵液，經(jīng)離心、除蛋白、醇沉、透析得到粗多糖的水溶液。粗多糖再經(jīng)凝膠過濾層析純化得到均一的多糖組分，冷凍干燥得到純多糖，產(chǎn)量分別為23.5 g/L和11.4 g/L。結(jié)合紫外分析、高效體積排阻色譜分析，兩株菌所產(chǎn)多糖均不含核酸和蛋白，重均分子量Mw分別為1.01×108 Da和8.79×107 Da。采用氣相色譜和薄層色譜分析單糖組成，結(jié)果表明兩株菌所產(chǎn)EPS均只含葡萄糖。
　　結(jié)合單糖組成分析、紅外光譜分析、核磁共振光譜分析，L.

4、citreum NM105所產(chǎn)EPS含有三種糖單元，分別為[→6)-α-D-Glcp-(1→]、[α-D-Glcp-(1→]和[→2,6)-α-D-Glcp-(1→]，摩爾比接近1:1:1，是一種帶有高含量的α-(1→2)糖苷鍵的支鏈多糖。而L.mesenteroides subsp.dextranicum2-19所產(chǎn)EPS是一種由α-(1→6)糖苷鍵連接的高度線性葡聚糖。
　　L.citreum NM105所產(chǎn)EPS的理化性質(zhì)分