RGD三肽的合成與縮合劑的回收.pdf

1、本文的目的是對RGD三肽的合成工藝和路線進行了探討,研究了液相化學法(DCC法、混合酸酐法等)合成GD二肽、RGD三肽的工藝,從而為RGD三肽的規(guī)?；苽涮峁├碚摶A和必要的技術數(shù)據(jù).同時首次開展了循環(huán)使用多肽縮和劑的研究,以期降低多肽合成的成本.本文以DCC法、混合酸酐法分別合成了RGD三肽前體二肽和全保護三肽,最后脫去保護基得到RGD.研究了多種因素包括反應時間、溶劑種類、底物配比等對化學合成RGD序列肽的影響.本文對實驗結果進行了

2、理論分析,并做出了相對合理的解釋,最終得到了如下結論:(1)四氫呋喃(THF)和N,N-二甲基甲酰胺(DMF)為化學法合成RGD前體二肽及全保護三肽的最佳溶劑.(2)DCC法和混合酸酐法都得到了Boc-Gly-Asp-(oBzl)<,2>中間體,為了進一步合成三肽,必須先脫去Boc基,用無水HCl/EtoAc溶液和TFA兩種方法,都能很好地脫去Boc基,但用HCl/EtoAc溶液可以得到HClGly-Asp-(oBzl)<,2>晶體,便

3、于重結晶純化,而用TFA得不到晶體,所以我們選擇HCl/EtoAc溶液作為脫Boc試劑.(3)以四氫呋喃(THF)、二甲基甲酰胺(DMF)為溶劑,DCC法合成全保護三肽Boc-Arg(NO<,2>)-Gly-Asp-(oBzl)<,2>,,得率76.1﹪.,為避免損失,直接由該三肽油狀物脫N端保護基,采用TFA為切割劑,室溫切割3h,最大得率70.1﹪(以Boc-Arg(NO<,2>)-OH計算).(4)以脫除N端保護的三肽為前體,采用

4、Pd/C催化加氫脫除所有側(cè)鏈保護基團,得到RGD粗品,得率97.4﹪.(5)首次對常用的多肽縮合劑DCC/HOBt進行回收循環(huán)使用的研究,對后處理液加以酸化處理,回收得到HOBt,回收率75.4﹪;對反應中生成的DCU加以脫水處理,采用三氯氧磷作為脫水劑,得到DCC,得率64﹪.(6)對RGD的合成進行了成本核算,按照生產(chǎn)1kgRGD計算,通過回收縮合劑及合成部分保護氨基酸,大大降低了RGD的生產(chǎn)成本,從35559.65元/kg降為14