瓊膠寡糖特效降解與分離純化的研究.pdf

1、瓊膠是從江蘺、石花菜等紅藻類提取出的一種膠質(zhì)體，而瓊脂糖則是以瓊膠為原料分離、精制而成的高級(jí)產(chǎn)品。瓊脂糖是由3-O-β-D-半乳糖和4-O-3,6-內(nèi)醚-α-L-半乳糖交替連接而成的鏈狀中性糖，瓊膠寡糖則是經(jīng)降解后聚合度為2～10的低聚糖，包括瓊寡(agaro-oligosaccharides)和新瓊寡糖(neoagaro-oligosaccharides)。兩種寡糖分別由瓊膠酶和酸降解所獲得，其中主要的一種酶β瓊膠酶可以裂解β，1-4

2、糖苷鍵生成新瓊寡糖；α瓊膠酶或酸則裂解α，1-3糖苷鍵產(chǎn)生瓊寡糖。瓊膠寡糖的研究顯示出其多種生物活性，且不同聚合度的寡糖變現(xiàn)出不同的生物活性。新瓊寡糖和瓊寡糖所具有的生物活性使其潛在的應(yīng)用價(jià)值非常大，所以具有重大研究價(jià)值，而寡糖的獲取、分離就顯得格外的重要。本課題瓊寡糖作為研究目標(biāo)，對(duì)其降解方法及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，通過不同的降解方法，獲得特定聚合度的瓊寡糖。
　　本文的主要工作和成果如下：
　　1.基于瓊膠寡糖的不同生物活性，

3、所以獲得特定聚合度的寡糖具有非常重大的意義。針對(duì)瓊膠降解產(chǎn)生多種不同聚合度的產(chǎn)物，本研究以通過特定的降解方式以獲得特定聚合度的瓊膠寡糖為目標(biāo)，采用不同的降解方式對(duì)瓊膠進(jìn)行降解。首先以瓊膠溶液反應(yīng)前后粘度的變化反映瓊膠降解速度的變化，研究表明鹽酸的降解主要為二糖、硫酸降解產(chǎn)物為二、四糖。
　　2.研究不同降解條件（不同的酸）對(duì)瓊脂糖進(jìn)行降解，并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行定性、定量分析。首先通過瓊膠溶液降解前后的粘度變化檢測(cè)降解速度，并對(duì)降解所得寡糖

4、混合物進(jìn)行TLC分析，初步確定了瓊膠降解條件；分別考察濃度、反應(yīng)時(shí)間、溫度、底物濃度等因素對(duì)降解瓊膠生產(chǎn)瓊膠寡糖的影響；最后根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)，結(jié)合HPLC及核磁分析，獲得了較優(yōu)的降解工藝條件。經(jīng)優(yōu)化后鹽酸降解瓊膠得到二糖的得率達(dá)到28.28％；硫酸降解瓊膠得到四糖得率為20.15%；檸檬酸降解降解瓊膠得到四糖的得率達(dá)到了16.83%。
　　3.采用LC-MS對(duì)對(duì)瓊膠的產(chǎn)物進(jìn)行了初步鑒定，結(jié)果顯示瓊膠的降解產(chǎn)物主要為偶