瓊膠寡糖誘導壇紫菜抗逆響應(yīng)及其機制研究.pdf

1、為了研究瓊膠寡糖誘導壇紫菜抗爛效應(yīng)，以不同濃度瓊膠寡糖處理室內(nèi)壇紫菜葉片，通過觀察葉片腐爛情況，篩選最佳處理方法，并將其應(yīng)用于海區(qū)壇紫菜養(yǎng)殖。此外，以瓊膠寡糖誘導下顯著產(chǎn)生的1-octen-3-ol來處理壇紫菜葉狀體，通過檢測H2O2和游離脂肪酸的釋放量、揮發(fā)性化合物含量、防御相關(guān)基因的差異表達來研究瓊膠寡糖誘導抗性的機制。室內(nèi)壇紫菜葉片培養(yǎng)至第4d，50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL瓊膠寡糖處理1h和2h組的葉片腐爛率

2、下降，其中100μg/mL瓊膠寡糖處理2h組的腐爛率最低，比空白組下降22.20％（p＜0.05），而且只出現(xiàn)輕度腐爛，并且顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，100μg/mL處理2h組葉片的腐爛面積和腐爛程度都比空白組要小。隨后，100μg/mL瓊膠寡糖處理壇紫菜葉片2h（處理2次或3次，間隔12h、1d、2d），在培養(yǎng)至第4d時，以處理2次（每次2h，2d一次）的效果最好，只有輕度腐爛，腐爛率比空白組下降37.31%（p＜0.01），而且腐爛程度也較輕

3、；在10-20d時，壇紫菜葉片總腐爛率達到100%，出現(xiàn)中度和重度腐爛，但處理組壇紫菜葉片狀態(tài)更好；至40d時，兩組壇紫菜葉片的腐爛情況基本一致。因此，100μg/mL瓊膠寡糖處理2次（2d一次，每次2h）誘導壇紫菜最佳抗爛作用，并且該抗性可持續(xù)約40d，比空白組延后10d。采用室內(nèi)篩選的最佳處理方式對海區(qū)日齡30 d的壇紫菜和殼孢子進行實驗。在第1水壇紫菜收割日（日齡45d壇紫菜），處理組壇紫菜葉片的寬度比空白組增加11.89%，30

4、條葉片和整張網(wǎng)簾的鮮重分別增加23.76%，23.82%，葉片尖端腐爛率下降19.36%，葉片狀態(tài)比空白組好；而對于殼孢子來說，海區(qū)網(wǎng)簾壇紫菜生長密度增加，壇紫菜葉片的長度、寬度、鮮重以及光合速率都有所上升，而葉片的成熟率下降（p＜0.01）。以10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L1-octen-3-ol處理壇紫菜葉狀體，在10-180min內(nèi)，Phrboh一直處于下調(diào)（p＜0.05或p＜0.01），同樣在5-15mi

5、n時，H2O2釋放量減少，在20-60min時，H2O2濃度比空白組明顯下降（p＜0.05或p＜0.01）；在30min時，C18和C20脂肪酸含量上升，同時Phlox1的轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)，尤其50μmol.L-1處理組達到最大值，為正常水平的10.13倍（p＜0.01）；在10-180min內(nèi)，壇紫菜Phlox1一直處于上調(diào)，因此在60min和180min時，C18和C20脂肪酸含量下降，短鏈的醇、醛、酮以及直鏈烴類化合物的含量增加。綜上