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1、分類號:學(xué)校代碼:10069密級:學(xué)號:Y20090199天津商業(yè)大學(xué)碩士研究生畢業(yè)(學(xué)位)論文碩士研究生畢業(yè)(學(xué)位)論文姓名:謝丹丹名:謝丹丹年級:級:二零零九二零零九級專業(yè):食品科學(xué)業(yè):食品科學(xué)研究方向:食品生物技術(shù)研究方向:食品生物技術(shù)論文題目:論文題目:高壓結(jié)合酶法對南美白對蝦過敏原消減技高壓結(jié)合酶法對南美白對蝦過敏原消減技術(shù)的研究術(shù)的研究導(dǎo)師:胡志和師:胡志和教授教授完成日期:完成日期:二零一二二零一二年五月天津商業(yè)大學(xué)摘要采
2、用超高壓法、超高壓處理后再用木瓜蛋白酶水解、超高壓下直接酶解等方法分別處理南美白對蝦水溶性蛋白,蝦肉組織和蝦仁,消減其過敏原。結(jié)果表明:對提取的水溶性蛋白,采用超高壓法處理,其最佳條件為:壓力150MPa、溫度45℃、保壓時間35min,產(chǎn)物抗原抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.1977,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低了66.2%;先高壓再用木瓜蛋白酶水解,其最佳條件為:350MPa、溫度45℃、保壓時間20min,產(chǎn)物抗原抗體反應(yīng)的OD4
3、92nm值為0.0492,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低了91.6%;超高壓下直接用木瓜蛋白酶處理,其最佳條件為:壓力300MPa、溫度45℃、保壓時間35min,產(chǎn)物抗原抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.05,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低了91.5%。所采用的三種方法,均對過敏原有消減作用,后兩種方法對過敏原的消減效果更好。對于南美白對蝦蝦肉組織,采用超高壓法處理,其最佳條件為:壓力200MPa,溫度40℃,保壓時間35min,此條件下產(chǎn)
4、物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.1986,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低了66.1%;先高壓再用木瓜蛋白酶水解,其水解的最佳條件為:底物質(zhì)量濃度10%,溫度60℃,酶底比1:200,此條件下產(chǎn)物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.0487,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低了91.7%;超高壓下直接用木瓜蛋白酶處理,其最佳條件為:壓力300MPa,溫度40℃,保壓時間35min,產(chǎn)物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.0516,與陽性反應(yīng)相比,
5、過敏原性降低了91.2%。所采用的三種方法均對過敏原有消減作用,后兩種方法對過敏原的消減效果更好。采用超高壓法和高壓結(jié)合酶法處理蝦仁,兩種方法對蝦仁中過敏原均有消減作用,高壓結(jié)合酶法對過敏原的消減作用更好。高壓法處理蝦仁的最佳條件為:壓力100MPa,溫度25℃,保壓時間15min,此條件下產(chǎn)物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.1925,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低67.1%;高壓結(jié)合酶法處理蝦仁的最佳條件為:壓力450MPa,溫度40
6、℃,保壓時間55min,酶底比1:130,此條件下產(chǎn)物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.084,與陽性反應(yīng)相比,過敏原性降低85.6%。同時,兩種方法都能促進蝦仁中過敏蛋白的溶出。當(dāng)采用高壓結(jié)合酶法處理蝦仁時,鹽水的濃度對蝦仁中過敏原的消減及過敏蛋白的溶出均有一定的影響。當(dāng)鹽水濃度為1.0%,壓力450MPa,溫度40℃,保壓時間55min,酶底比1:130,經(jīng)過酶聯(lián)免疫檢測,產(chǎn)物與抗體反應(yīng)的OD492nm值為0.074,與陽性反應(yīng)相比
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