基于寬譜特異性免疫識別的可拋型農(nóng)藥殘留電化學(xué)免疫傳感器的研究.pdf

1、電化學(xué)免疫傳感器是電分析化學(xué)領(lǐng)域的重要研究方向之一。電化學(xué)免疫傳感器具有高選擇性、高靈敏度、低使用成本等優(yōu)點(diǎn)，且儀器簡單、操作方便，無需復(fù)雜的前處理過程，易于實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場檢測。隨著新型的電極材料、標(biāo)記材料和手段的發(fā)展，以及各種表征手段的日趨完善，電化學(xué)免疫傳感器已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、食品分析、農(nóng)產(chǎn)品分析、環(huán)境檢測等領(lǐng)域，特別是在對環(huán)境中有毒有害物質(zhì)的檢測方面發(fā)揮巨大的作用。
　　 我國是農(nóng)藥生產(chǎn)的第一大國，也是農(nóng)藥消費(fèi)的第二大國。雖然

2、國家已明令禁止使用如對硫磷、甲胺磷等高毒性農(nóng)藥，但偷用、濫用情況仍廣泛存在，農(nóng)藥污染問題突出，嚴(yán)重危害著人們的身體健康。傳統(tǒng)的農(nóng)藥殘留檢測方法由于使用儀器昂貴，樣品前處理復(fù)雜等缺點(diǎn)，無法適應(yīng)現(xiàn)場的快速檢測和方法的普及，因此，建立快速、準(zhǔn)確、方便和廉價的農(nóng)藥殘留檢測方法成為亟待解決的問題。
　　 本學(xué)位論文在國家自然科學(xué)基金(20575082，20805759)和廣東省自然科學(xué)基金(7003714)的資助下，以對硫磷和蠅毒磷等高毒

3、性農(nóng)藥為研究對象，利用寬譜型抗體分子為識別探針，并以ITO可拋型電極為基底電極，建立了對硫磷和蠅毒磷的電化學(xué)免疫傳感器。全文共3章，主要內(nèi)容如下：
　　 1、綜述了電化學(xué)免疫傳感器的發(fā)展歷史和研究進(jìn)展；綜述了ITO電極的設(shè)計、制備和發(fā)展，及其在電化學(xué)傳感器方面的應(yīng)用。
　　 2、建立了農(nóng)藥中對硫磷可拋型免標(biāo)記的免疫分析方法?；趶?qiáng)弱抗原在寬譜型抗體上的競爭性結(jié)合，利用ITO電極為基底電極，將對硫磷寬譜型多克隆抗體共價交聯(lián)

4、到聚鄰氨基苯甲酸修飾的電極表面，并特異性包被弱親和性抗原。以鐵氰化鉀分子為電活性探針，當(dāng)加入對硫磷抗原后，其與包被的抗原發(fā)生競爭抗體，改變鐵氰化鉀分子在電極表面的電子傳遞能力。結(jié)果表明，所制備的免疫傳感器在對硫磷為1.0-10.0μgmL-1濃度范圍內(nèi)具有較好的線性響應(yīng)，線性方程為△I(％)=0.330+3.27c(μg mL-1)，相關(guān)系數(shù)為0.9985，檢出限為73.0 ng mL-1。該方法有望進(jìn)一步用于二乙氧基硫代磷酸酯“次級結(jié)

5、構(gòu)”片段的農(nóng)藥殘留的檢測。
　　 3、建立了農(nóng)藥中蠅毒磷的電化學(xué)免疫分析方法。以ITO電極為基底電極，通過將蠅毒磷寬譜型多克隆抗體共價交聯(lián)到聚鄰氨基苯甲酸修飾的電極表面，并特異性包被二茂鐵標(biāo)記的半抗原-聚乙烯亞胺結(jié)合物((hapten)3-bPEI-(Fc)5)。其中，bPEI鏈上的二茂鐵分子在電極表面產(chǎn)生電化學(xué)響應(yīng)。當(dāng)加入蠅毒磷農(nóng)藥分子后，其與(hapten)3-bPEI-(Fc)5上的半抗原競爭結(jié)合抗體，導(dǎo)致電化學(xué)信號的變化