基于導(dǎo)電聚合物膜的電化學(xué)免疫傳感器的研究.pdf

1、電化學(xué)免疫傳感器是將免疫分析技術(shù)與電化學(xué)傳感器相結(jié)合的一種新型免疫分析方法，是基于測量電流、電位變化來進(jìn)行免疫分析的生物傳感器。電化學(xué)免疫傳感器在臨床醫(yī)學(xué)、環(huán)境和食品工業(yè)等方面都有重要應(yīng)用，并以其體積小、專一度強(qiáng)、靈敏度高、檢測快速方便、成本低和容易實(shí)現(xiàn)實(shí)時在線活體檢測等優(yōu)點(diǎn)，成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)之一。
　　 在電化學(xué)免疫傳感器的構(gòu)建中，如何有效地利用生物分子固定化技術(shù)及固定化材料決定著生物傳感器的穩(wěn)定性、靈敏度和選擇性等主要性能

2、。此外，將抗原/抗體之間結(jié)合所產(chǎn)生的電化學(xué)信號進(jìn)行放大在制備高靈敏電化學(xué)免疫傳感器方面也具有相當(dāng)重要的意義。正是基于以上考慮，本文結(jié)合導(dǎo)電聚合物膜良好的電子傳遞特性，酶的化學(xué)放大作用，以及納米金大的比表面積和良好的生物兼容性，構(gòu)建了三種電化學(xué)免疫傳感器。主要內(nèi)容如下：
　　 1．用循環(huán)伏安法在玻碳電極(GCE)上電聚合一層穩(wěn)定的中性紅聚合物膜，通過戊二醛的共價鍵合作用將癌胚抗體(anti-CEA)固定到電極表面上，進(jìn)而用牛血清白

3、蛋白(BSA)封閉電極上的非特異性吸附位點(diǎn)，采用雙抗體夾心的方法制得高靈敏電流型癌胚抗原免疫傳感器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該傳感器對癌胚抗原具有良好的電流響應(yīng)，該傳感器的線性范圍為0.50～10.0ngmL-1和10.0～80.0ngmL-1，檢出限(3σ)為0.20ngmL-1。該方法制備的電化學(xué)免疫傳感器對CEA的檢測較為理想，有一定的應(yīng)用價值。
　　 2．以聚合物膜電極為基體，通過戊二醛的共價鍵合作用將甲胎蛋白抗體自組裝到電極表面

4、上，最后用辣根過氧化物酶封閉電極上的非特異性吸附位點(diǎn)，并同時起到放大響應(yīng)電流信號的作用，制得高靈敏伏安型甲胎蛋白抗原免疫傳感器。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該傳感器對甲胎蛋白抗原具有良好的電流響應(yīng)，該傳感器的線性范圍為1.00～10.0ngmL-1和10.0～200ngmL-1，檢出限(3σ)為0.40ngmL-1。該方法中電極制備簡單，操作簡便，有較高的靈敏度，實(shí)現(xiàn)了對甲胎蛋白的免疫分析。
　　 3．基于免疫反應(yīng)對聚硫堇在光激發(fā)下氧化底物H

5、2O2的阻礙而產(chǎn)生的光致電化學(xué)響應(yīng)，制備了無標(biāo)記癌胚抗原免疫傳感器。將硫堇聚合到玻碳電極表面形成帶正電的多孔聚硫堇(PTH)復(fù)合膜，通過靜電吸附固定納米金，利用納米金大的比表面積和強(qiáng)的吸附能力將癌胚抗體固定到電極表面，通過循環(huán)伏安法和光電流法考察了修飾電極的光電化學(xué)行為，并對免疫傳感器的性能進(jìn)行了詳細(xì)研究。在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，該傳感器的響應(yīng)電流值與癌胚抗原濃度的對數(shù)值在1.00～80.0ngmL-1的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系，檢出限(3σ