電化學(xué)免疫傳感器的初步研制.pdf

1、分子診斷效果精確、快速而且簡(jiǎn)便，是傳統(tǒng)的臨床、組織病理和流行病學(xué)等診斷方法不能相比的。目前除核酸探針、PCR技術(shù)等技術(shù)外，生物芯片、分子烙印技術(shù)以及生物傳感器等生命科學(xué)領(lǐng)域中的一些高技術(shù)也正在被開(kāi)發(fā)應(yīng)用于分子診斷領(lǐng)域，本研究對(duì)生物傳感器和生物芯片技術(shù)進(jìn)行了初步探索。
　　 將靶標(biāo)分子通過(guò)物理吸附或化學(xué)方法固定在某種固體材料上是制備生物芯片和生物傳感器的核心步驟，是制備高質(zhì)量蛋白質(zhì)芯片的關(guān)鍵問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)PMMA表面進(jìn)行化學(xué)處

2、理，然后用于蛋白分子的固定。結(jié)果表明處理后的PMMA不僅能固定蛋白質(zhì)分子，而且固定后的蛋白質(zhì)分子能保持活性，實(shí)驗(yàn)獲得了良好的效果。結(jié)果還證明其固定蛋白分子效果還明顯優(yōu)于目前比較常用的醛基化玻片，說(shuō)明有機(jī)玻璃這種可塑性很強(qiáng)的材料也用來(lái)固定蛋白分子，經(jīng)進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)測(cè)試有可能為蛋白質(zhì)芯片研制提供新的優(yōu)良的基片材料。
　　 電化學(xué)免疫傳感器在檢測(cè)方面具有經(jīng)濟(jì)、靈敏度高、方法簡(jiǎn)單、快速、操作簡(jiǎn)便等諸多優(yōu)點(diǎn)。電化學(xué)免疫傳感器主要由生物分子識(shí)

3、別和信息轉(zhuǎn)換部件兩部分組合構(gòu)成。研制生物傳感器的前提或核心問(wèn)題是如何制備穩(wěn)定的生物傳感器的信息轉(zhuǎn)換部件即工作電極。本研究探索兩種方法制備傳感器的工作電極，并以此為基礎(chǔ)建立電化學(xué)免疫傳感器系統(tǒng)。
　　 方法一：參考前人非金屬化學(xué)鍍方法，在施鍍過(guò)程中通過(guò)對(duì)一些實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn)，成功的在了PMMA和石墨兩種材料上進(jìn)行了鍍鎳和鍍金，并用這些材料制作了傳感器的工作電極。方法二通過(guò)電化學(xué)方法，在鉑片表面快速電沉積聚苯胺膜，制作成工作電

4、極。
　　 實(shí)驗(yàn)用鍍金電極進(jìn)行了分子自組裝和連接，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該電極不能耐受酸性環(huán)境，同時(shí)堿處理又不能活化該電極表面活性位點(diǎn)，而且其本身電化學(xué)特性很不穩(wěn)定。因此鍍金膜電極作為傳感器工作電極的免疫傳感器系統(tǒng)的建立還需要進(jìn)一步的探討和研究。
　　 在鉑基聚苯胺膜上固定抗體，并用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗與一抗結(jié)合，制成免疫工作電極。使用該電極建立電化學(xué)免疫傳感器檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行免疫電化學(xué)測(cè)試實(shí)驗(yàn)，經(jīng)過(guò)連續(xù)和穩(wěn)定性測(cè)試，結(jié)果證明該工作電