擴展青霉FS1884堿性脂肪酶的表征研究及其晶體的培養(yǎng).pdf

1、我國脂肪酶的研究只有40多年歷史，20世紀60年代末才有報道。1967年，中國科學院微生物研究所篩選到一株解枝假絲酵母AS2.1203。20世紀70年代末我國開始堿性脂肪酶的研究，施巧琴教授于1981年在國內(nèi)成功篩選了堿性脂肪酶生產(chǎn)菌，并且于1984年首次在江蘇南通投入生產(chǎn)。進入90年代，我國科技工作者緊跟國際研究熱點，脂肪酶的研究進入快速發(fā)展時期，這些都促進和加快了我國脂肪酶領域的研究工作?！　U展青霉FS1884堿性脂酶是多代篩選

2、后得到的更優(yōu)良的產(chǎn)酶菌株，本文對該堿性脂肪酶進行了表征、酶學特性、穩(wěn)定性及結晶條件的研究，為研究該酶的催化特性及應用等方面提供了依據(jù)：　　該堿性脂肪酶N-端氨基酸序列測定的結果是：ATADAAAFPDLHRAAKLSSA，等電點為5.44，用質(zhì)譜分析得到該酶的肽質(zhì)紋圖譜，在圖譜中該酶為雙電荷峰，分子量為261380.0922Da，并且不含糖基。賴氨酸氨基，組氨酸咪唑基及二硫鍵是它的活性必需基團，而巰基是維持酶的特定結構的重要基團，該結

3、構與堿性脂肪酶活力有一定關系?！　≡撁傅淖钸m作用pH為9.4，最適作用溫度為36℃，在pH7～11與20℃以下相對穩(wěn)定；二價離子，特別是Ca2+對該酶活力有促進作用；以橄欖油為底物時的Km為0.035g/mL，對硝基苯棕櫚酸為底物時的Km為60.61μg/mL。羧酸鈉，單糖，雙糖，多元醇對該堿性脂肪酶都能起到一定的穩(wěn)定效果，尤其是單糖，對該堿性脂肪酶的熱穩(wěn)定性具有顯著作用?！　∮猛聹?80使在乳化液配制的SDS凝膠中電泳后的脂肪酶復