Real Time PCR評(píng)價(jià)血液制品中指示病毒滅活去除效率的模型建立.pdf

1、本研究以戊二醛聚合豬血紅蛋白模擬血液制品，選取PRV、PPV分別作為血液制品中有包膜DNA指示病毒和無包膜DNA指示病毒，針對(duì)特定兩種指示病毒PRV、PPV，進(jìn)行了生物信息學(xué)分析，選取特定片段作為擴(kuò)增靶點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，建立了一種基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的檢測(cè)方法，聯(lián)合病毒的細(xì)胞感染力實(shí)驗(yàn)，用以評(píng)價(jià)血液制品中指示病毒的滅活去除效率。初步建立了一種新的病毒去除方法，利用物理吸附將針對(duì)指示病毒的抗血清偶聯(lián)至微米級(jí)的金磁顆粒，利用偶聯(lián)至金磁顆粒表

2、面的抗體捕捉樣品中的病毒顆粒，再通過磁性分離金磁顆粒達(dá)到凈化血液制品的目的。對(duì)兩種指示病毒分別進(jìn)行巴氏滅毒和偶聯(lián)抗血清金磁顆粒處理，實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)核酸變化確定病毒的去除效率，同時(shí)進(jìn)行病毒的細(xì)胞感染力實(shí)驗(yàn)確定病毒的滅活效率，結(jié)果顯示：在對(duì)DNA有包膜病毒的去除能力上，金磁顆粒法明顯優(yōu)于普通的巴氏滅活法；在對(duì)DNA有包膜病毒滅活能力上，巴氏法明顯優(yōu)于金磁顆粒法。在對(duì)DNA無包膜病毒的去除能力上，金磁顆粒法明顯優(yōu)于普通的巴氏滅活法；在