乳酸菌素Lacticin 518的分離純化及其理化性質(zhì)研究.pdf

1、乳酸菌細菌素在食品防腐劑和醫(yī)藥領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用前景，細菌素的分離純化是研究其分子結(jié)構(gòu)及遺傳學(xué)特性的重要基礎(chǔ)。論文研究了乳酸乳球菌乳酸亞種(Lactococcus lactis subsp. Lactis)Lactc518所產(chǎn)的乳酸菌素Lacticin518的分離純化工藝和理化特性。
　　 摸索了乳酸菌素Lacticin518的純化方法，采用飽和度為40％硫酸銨沉淀處理發(fā)酵上清液。之后進行SephadexG-50凝膠過濾層析，流

2、速為1.2mL/min。活性峰再進行疏水作用層析，使用苯基預(yù)裝柱HiPrepTM16/10 Phenyl(low,sub)，柱體積為20mL，流速7.0mL/min。結(jié)合緩沖液A為50mmol/L pH6.0PBS緩沖液，含2mol/LNaCl;洗脫緩沖液B為50mmol/LpH6.0PBS緩沖液。以60mL緩沖液A沖洗，；60mL緩沖液進行梯度洗脫：B的濃度70%-100%(實際是NaCl濃度的由30%降到0)，140mL緩沖液B洗脫

3、?；钚苑逵弥苽湫头聪喔咝б合嗌V進行制備，梯度洗脫條件為0-5min:100%流動相A洗脫；5-27min:流動相B從O到100%:27-35min:100%的流動相B洗脫：流速：3.0mL/min。流動相A為雙蒸水，流動相為乙腈，均含有0.1%TFA(v/v)。采用上述流程，得到了單一活性峰，比活力提高了236.718倍，得率為1.021%。
　　 測定了乳酸菌素Lacticin518的表觀分子量。經(jīng)Tricine-SDS-P

4、AGE電泳檢測Lacticin518的凝膠過濾層析活性峰，結(jié)果顯示其表觀分子量處于4.1kDa至6.5kDa之間。
　　 研究了乳酸菌素Lacticin518的抑菌譜，結(jié)果表明乳酸菌素Lacticin518對乳桿菌Lactb0801、植物乳桿菌、乳酸片球菌、戊糖乳桿菌、瑞士乳桿菌、短乳桿菌、食果糖乳桿菌、糞腸球菌、嗜熱鏈球菌、四聯(lián)球菌、蘇云金芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌等革蘭氏陽性菌有抑制作用；對革蘭氏陽性菌中的乳酸乳

5、球菌乳脂亞種、干酪乳桿菌無抑制作用；對雞白痢沙門氏菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、普通變形桿菌等革蘭氏陰性菌無抑制作用。
　　 研究了乳酸菌素Lacticin518的pH活性范圍，結(jié)果表明在pH3-8范圍內(nèi)乳酸菌素Lacticin518都有抑菌能力。
　　 研究了乳酸菌素Lacticin518在不同pH值下對熱的穩(wěn)定性，結(jié)果表明乳酸菌素Lacticin518在酸性條件下對熱穩(wěn)定；在堿性條件下對熱不穩(wěn)定，活性會隨著溫度的升高而逐漸