鳥氨酸生產(chǎn)菌種選育.pdf

1、L-鳥氨酸存在于生物體多種組織和細(xì)胞中,在生物體代謝中起到重要作用。它是尿素生成的中間產(chǎn)物,是精氨酸、瓜氨酸等多種氨基酸代謝的前體物質(zhì),主要參與產(chǎn)尿素的鳥氨酸循環(huán)中,對(duì)體內(nèi)集聚的氨具有解毒作用。L-鳥氨酸主要用于制備保肝、護(hù)肝、治療肝病、抗疲勞、抗虛弱等各種復(fù)方氨基酸輸液。目前制備L-鳥氨酸的方法主要有提取法,化學(xué)法,微生物發(fā)酵法和酶法。酶法是利用動(dòng)植物或微生物體內(nèi)的精氨酸酶作催化劑,水解精氨酸,生成鳥氨酸和尿素。
　　 本文研

2、究了鳥氨酸氨甲?；D(zhuǎn)移酶缺陷型菌株的篩選,固定化蘇云金芽孢桿菌細(xì)胞轉(zhuǎn)化L-鳥氨酸的方法以及L-鳥氨酸與牛血清白蛋白相互作用的光譜學(xué)性質(zhì),目的在于尋找成本低廉,工藝簡(jiǎn)潔,質(zhì)量可靠的L-鳥氨酸生產(chǎn)路線,為今后L-鳥氨酸的工業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。
　　 本實(shí)驗(yàn)利用實(shí)驗(yàn)室保藏的一株蘇云金芽孢桿菌進(jìn)行誘變,確定了培養(yǎng)基中的無機(jī)氮源采用乙酸銨,其濃度為O.9％,復(fù)合誘變處理中的硫酸二乙酯處理時(shí)間為5min,紫外照射時(shí)間為1min。
　　

3、 采用PVA與卡拉膠對(duì)菌體細(xì)胞進(jìn)行固定化,確定了PVA濃度為5％,卡拉膠濃度為2.5％,固定化9h后所得的固定化細(xì)胞操作穩(wěn)定性較高,可反復(fù)利用7次而L-鳥氨酸產(chǎn)量基本不變。
　　 同時(shí)確定了在搖床中固定化細(xì)胞轉(zhuǎn)化制備L-鳥氨酸的最適條件:溫度30℃、pH10.0、轉(zhuǎn)化時(shí)間24h、L-精氨酸濃度100g.L-1,得到的L-鳥氨酸濃度最高為31.04g.L-1,是游離細(xì)胞產(chǎn)量的71.24％。
　　 通過對(duì)L-鳥氨酸與牛血清白