阿維菌素生產(chǎn)菌種的選育及發(fā)酵工藝的優(yōu)化.pdf

1、阿維菌素(Avermectin)是一種由阿維鏈霉菌(Streptomyces avermitilis)發(fā)酵產(chǎn)生的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，在農(nóng)作物、畜禽及人用藥等方面均有應(yīng)用。本文以阿維菌素生產(chǎn)菌株QL69為研究對象，以提高阿維菌素的發(fā)酵水平為研究目的，圍繞菌種誘變篩選、發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化以及發(fā)酵工藝優(yōu)化進行了相關(guān)研究。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.采用UV、LiC1、NTG相結(jié)合的誘變方法對阿維菌素生產(chǎn)菌種進行選育，篩選獲得1株高

2、產(chǎn)菌株UV-NTG-A7，實驗結(jié)果表明，在UV誘變60s，在NTG誘變濃度2.05mg/ml時，對現(xiàn)有出發(fā)菌株誘變條件最佳，得到高產(chǎn)突變株比對照菌株在小試試驗罐上提高了9.6％，突變株經(jīng)傳代5次，其遺傳穩(wěn)定性較好。
　　2.對高產(chǎn)突變株UV-NTG-A7的發(fā)酵培養(yǎng)基進行了優(yōu)化，通過對碳源、氮源進行替代實驗，結(jié)合物料市場價格，選擇廉價的玉米淀粉、高溫黃豆餅粉作為最適碳、氮源。微量元素實驗結(jié)果表明，當添加硫酸鎳、氯化鈷、硫酸錳、鉬酸鈉

3、、硫酸銨濃度分別為0.0003％,0.02％,0.0002％，0.0023％，0.03％時，對阿維菌素效價均有提高。在發(fā)酵24h加入0.6％濃度的前體物質(zhì)丙酸鈣，可以使發(fā)酵效價提高4.11％。
　　3.對發(fā)酵工藝進行了優(yōu)化，種子瓶考察確定了高產(chǎn)菌種UV-NTG-A7在轉(zhuǎn)入種子罐時種子瓶種齡選擇25h較合適，種子罐轉(zhuǎn)種時機為42h最佳，且其發(fā)酵效價達到6346.0μg/ml，高于其它轉(zhuǎn)種時間點。不同的轉(zhuǎn)種量實驗，確定了8％的轉(zhuǎn)種量為