裂蹄木層孔菌發(fā)酵工藝及其發(fā)酵菌絲藥效研究.pdf

1、裂蹄木層孔菌(Phellinus linteus)是一種藥用真菌，屬于針層孔菌屬。中國(guó)古籍藥典中有記載，裂蹄木層孔菌具有促進(jìn)血液循環(huán)和增強(qiáng)解毒等功效。隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)的不斷發(fā)展，許多學(xué)者對(duì)裂蹄木層孔菌具有出眾的抑制腫瘤以及提高機(jī)體免疫的能力進(jìn)行了深入并且廣泛的研究，特別是從裂蹄木層孔菌中尋找新的抗腫瘤化合物的研究，已經(jīng)成為藥用真菌研究的一個(gè)熱點(diǎn)。最近的研究揭示裂蹄木層孔菌和現(xiàn)有化療藥物共同作用時(shí)，具有增強(qiáng)化療藥物藥效的作用，這引起

2、了研究人員更廣泛的關(guān)注。
　　 裂蹄木層孔菌野生資源非常匱乏，不但產(chǎn)量小而且采摘困難，不僅如此，由于環(huán)境污染等問(wèn)題，使得這種珍稀藥用真菌的研究和大規(guī)模的利用面對(duì)著非常嚴(yán)竣的資源問(wèn)題。我們使用液體深層發(fā)酵的技術(shù)解決了這一問(wèn)題，得到最優(yōu)培養(yǎng)基組成為：葡萄糖5％，牛肉膏1.5％，豆餅粉0.75％，硫酸鎂0.06％，磷酸氫二鉀0.06％。最優(yōu)的發(fā)酵條件為：發(fā)酵時(shí)間，9天；發(fā)酵溫度，27.5℃，初始pH，6.0；搖床轉(zhuǎn)速，175rpm；接

3、種量，10％。用最優(yōu)培養(yǎng)基發(fā)酵驗(yàn)證發(fā)酵得到菌絲干重為30.891±0.885g/L，胞外多糖產(chǎn)量為2.651±0.075g/L，分別是優(yōu)化前的1.5倍和2.5倍。
　　 實(shí)驗(yàn)證實(shí)裂蹄木層孔菌胞外多糖具有抗腫瘤的能力，當(dāng)0.75mg/ml的裂蹄木層孔菌胞外多糖作用72h后，人胃癌腫瘤細(xì)胞系SGC-7901的腫瘤細(xì)胞抑制率可以達(dá)到34.5％。裂蹄木層孔菌胞外多糖可以增敏阿霉素誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的凋亡，在阿霉素亞毒性濃度的時(shí)候可以顯著提高

4、腫瘤抑制效率，0.1ug/ml阿霉素作用72h后，腫瘤細(xì)胞抑制率為43.89％，而加入0.25mg/ml的裂蹄木層孔菌胞外多糖協(xié)同作用72h后，腫瘤細(xì)胞的抑制率就可以達(dá)到66.13％。
　　 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，250mg/kg的裂蹄木層孔菌醇提物單獨(dú)作用時(shí)可以顯著減小胃癌腫瘤，而它在不同濃度下(125、250和500mg/kg)協(xié)同30mg/kg環(huán)磷酰胺共同作用，均可以顯著減小腫瘤，值得我們注意的是，裂蹄木層孔菌醇提物對(duì)化療藥物