版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、乳酸菌是人和動(dòng)物腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)微生物菌群,益生性的乳酸菌在機(jī)體內(nèi)有調(diào)節(jié)人和動(dòng)物體微生態(tài)平衡,抑制并殺死致病菌,增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用。黏附是乳酸菌定植于宿主腸道發(fā)揮各種生理作用的前提。研究乳酸菌的黏附機(jī)制對(duì)于微生態(tài)制劑的開(kāi)發(fā)應(yīng)用具有重要的研究意義。
本研究以本實(shí)驗(yàn)室保存的從嬰兒糞便中篩選得到的一株產(chǎn)細(xì)菌素的植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum ZJ316)為研究對(duì)象。采用微生物黏著碳?xì)浠衔锓?MATH)
2、測(cè)定了三株乳酸菌(植物乳桿菌ZJ316、植物乳桿菌ZJ22、屎腸球菌ZJ19)疏水性、表面電荷和自聚合能力等表面性質(zhì),并且進(jìn)行了酵母凝集實(shí)驗(yàn)測(cè)定乳酸菌的糖類(lèi)專(zhuān)一性。結(jié)果顯示,植物乳桿菌ZJ316的疏水性最高(83.67±1.13)。酵母凝集實(shí)驗(yàn)表明植物乳桿菌ZJ316的酵母凝集度為32,加入了D-甘露糖和甲基-α-D-甘露糖苷的的實(shí)驗(yàn)組,乳酸菌的黏附力下降,說(shuō)明植物乳桿菌(Lactobacillus plantarumZJ316)的黏附
3、與特異性黏附中的甘露糖結(jié)合相關(guān)聯(lián)。
以Lactobacillus plantarum WCFS1表層黏附蛋白Slp2588、黏液黏附蛋白Muc2486黏附蛋白基因序列(1062815)、(1062646)進(jìn)行引物設(shè)計(jì),在Lactobacillus plantarumZJ316中,克隆黏附基因并進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序結(jié)果為:基因片段slp2588A長(zhǎng)度為1618 bp,基因片段muc2486A長(zhǎng)度為3018 bp。在NCBI網(wǎng)站用B
4、LAST軟件相似性比較,結(jié)果顯示,基因片段slp2588A和Lactobacillus plantarum WCFS1中的黏附基因slp2588相似性為98%;基因片段muc2486A和L.plantarumWCFS1中的黏附基因muc2486相似性為99%。因此,我們初步判斷在植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)ZJ316基因組中存在表層黏附蛋白Slp2588和粘液黏附蛋白Muc2486基因序列。
5、 將含有相同黏性末端的目的片段(slp2588A、muc2486A)與質(zhì)粒載體(pET-28a)體外重組構(gòu)建原核表達(dá)載體。將重組載體轉(zhuǎn)入BL21(DE3)中,IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳顯示有目的蛋白條帶。離心收集重組體菌體,超聲波破碎離心,發(fā)現(xiàn)沉淀中含有目的蛋白,說(shuō)明目的蛋白以包含體的形式表達(dá),沒(méi)有活性,需要復(fù)性才能分離純化。將兩個(gè)目的蛋白的包含體進(jìn)行酵母凝集實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)酵母凝集能力更強(qiáng)。說(shuō)明構(gòu)建大腸桿菌BL21(DE3
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 植物乳桿菌ZJ316細(xì)菌素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因的克隆和表達(dá)研究.pdf
- 植物乳桿菌ZJ316細(xì)菌素合成調(diào)控基因plnC和plnD表達(dá)及蛋白純化.pdf
- 植物乳桿菌ZJ316對(duì)斷奶仔豬的益生作用.pdf
- 基因重組PCT蛋白在大腸桿菌中的克隆表達(dá)和純化.pdf
- 大鼠CuZnSOD基因克隆及在大腸桿菌中的高效表達(dá).pdf
- DNase B基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 源于植物乳桿菌的抗菌肽Lac-B23基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)研究.pdf
- 植物乳桿菌ZJ316產(chǎn)細(xì)菌素遺傳性狀改造的初探.pdf
- 防御素基因克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 大腸桿菌中的基因表達(dá)
- 胸膜肺炎放線桿菌APXⅡA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 38097.renalase基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)
- 綠色熒光蛋白基因在大腸桿菌中的克隆與表達(dá)
- 桃pgip基因cDNA的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 柞蠶6-Tox基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- HER2胞外區(qū)基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 人NKp46基因克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 甘薯病毒G(SPVG)外殼蛋白基因的克隆、序列分析及在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 野桑蠶羧酸酯酶基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
- 牛分枝桿菌MPB83基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá).pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論