腐敗希瓦氏菌代謝氧化三甲胺相關(guān)研究.pdf

1、對來源于鱈魚魚肉混合菌群進行分離純化，檢測了菌群代謝TMAO的能力進行，分析了在TMAO代謝過程中細菌參與其中可能的途徑。對其中能夠代謝TMAO的細菌YY進行了16SrDNA的分析鑒定，對于經(jīng)過反復(fù)培養(yǎng)能夠穩(wěn)定代謝TMAO的菌株YY再經(jīng)過Biolog微孔鑒定，以及菌體脂肪酸成分的鑒定與分析，最終確定這株菌是(Shewanella putrefaciens腐敗希瓦氏)，在目前國內(nèi)外能夠代謝TMAO的細菌的文獻中有過報道。TMAO可能是YY

2、菌株呼吸產(chǎn)能過程中的電子傳遞的最終受體，并被其還原為TMA，而且對TMAO的還原產(chǎn)物TMA不能繼續(xù)代謝產(chǎn)生甲醛或者其他含氮物質(zhì)。
　　 本文通過分析24h內(nèi)菌株YY在有氧和厭氧條件下對TMAO的利用情況和細菌的生長情況，確定TMAO還原所發(fā)生的階段是在的YY生長對數(shù)期，這與目前報道是一致的。通過對YY在有氧和厭氧條件下進行培養(yǎng)，同時對發(fā)酵液中TMAO及其代謝產(chǎn)物進行的的檢測，發(fā)現(xiàn)在生長過程中，YY對TMAO的還原沒有受氧氣的抑制

3、，而在有氧條件下比厭氧條件下對TMAO還原程度更大，這說明在這YY細菌中所存在的TMAO還原酶在氧氣存在時具有更高的活性，與此前報道的大腸桿菌等細菌中的TMAO還原酶可能不同，并且可能存在著其他電子轉(zhuǎn)移方式，與大腸桿菌以細胞色素為中間介質(zhì)的電子傳遞過程有所差異此外，通過在新鮮鱈魚肉中分別加入適當(dāng)濃度的YY菌懸液，置于4℃冷藏溫度和室溫25℃下恒溫恒濕培養(yǎng)，并用加入對應(yīng)體積的無菌生理鹽水的新鮮鱈魚肉作空白對照，通過感官觀察發(fā)現(xiàn)，在室溫條件

4、下加入菌懸液的鱈魚肉細菌大量繁殖，并且迅速導(dǎo)致魚肉的腐敗。將魚肉中TMAO及其代謝產(chǎn)物的檢測結(jié)果與空白對照進行對比，發(fā)現(xiàn)魚肉在細菌侵染的情況下，其中的TMAO迅速被還原為TMA，而且魚肉中的TMAOase也被快速的激活，在4h時就有TMA的產(chǎn)生，并隨著腐敗過程而逐漸積累。這說明鱈魚肉能為YY提供非常好的生長環(huán)境，YY菌懸液加入后，細菌快速生長繁殖導(dǎo)致魚肉組織的迅速軟化和水解，加速了魚肉的腐敗，而這一過程又促進了組織中的TMAOase釋放

5、與激活，使魚肉組織中的DMA和FA含量迅速增加。
　　 溫度為15℃～35℃之間TMAO的代謝率基本上隨著溫度升高而略有升高，8h后逐漸趨同。菌株YY為廣耐鹽細菌，最適鹽度為15g/L～35g/L，隨著鹽度的升高，YY菌株的生長能力與代謝TMAO的能力受到限制。鹽度對菌株YY代謝TMAO的影響比對菌株自身生長的影響要更為明顯，作用也較為突出。
　　 pH通過影響微生物體內(nèi)代謝過程中酶的活性，從而影響微生物TMAO的代謝速