植物乳桿菌ZJ217產(chǎn)細(xì)菌素的研究.pdf

1、食品防腐劑是食品工業(yè)中一種重要的食品添加劑，它是防止食品腐敗變質(zhì)的一種有效的方法。目前我國食品防腐劑還是以化學(xué)防腐劑為主，可能存在著食品安全隱患。Nisin是世界公認(rèn)安全的天然食品防腐劑;但Nisin抗菌譜較窄，只能抑制革蘭氏陽性菌，對革蘭氏陰性細(xì)菌、酵母菌及霉菌無抑制作用。植物乳桿菌素(Plantaricin)是由植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)產(chǎn)生的一種耐高溫、耐酸、在人體中可降解、安全無毒，且具有較強(qiáng)抑

2、菌活性的抗菌短肽。
　　本文從多個生鮮牛乳樣品中篩選出1株產(chǎn)細(xì)菌素的菌株，并對該菌株進(jìn)行了分類鑒定。在此基礎(chǔ)之上，對植物乳桿菌ZJ217產(chǎn)生的具廣譜抑菌活性的細(xì)菌素plantaricin ZJ217，進(jìn)行了較為深入的研究。具體研究結(jié)果如下:
　　1.我們從生鮮牛乳樣品中分離到一株產(chǎn)細(xì)菌素的菌株，通過形態(tài)學(xué)觀察，生理生化特征分析和16S rDNA進(jìn)化分析對該菌株進(jìn)行了鑒定，發(fā)現(xiàn)該菌是一株植物乳桿菌屬菌種，將其命名為植物乳桿菌Z

3、J217(Lactobacillus plantarumZ J217)，相應(yīng)地其所產(chǎn)細(xì)菌素命名為植物乳桿菌素ZJ217（plantaricin J217）。
　　2.發(fā)酵上清液經(jīng)疏水層析、離子交換色譜、凝膠過濾色譜和反向HPLC純化后，plantaricin ZJ217得到了較好的分離，出現(xiàn)了單獨活力峰，表明該細(xì)菌素樣品已經(jīng)達(dá)到了單一組分。Plantaricin ZJ217的純化倍數(shù)為301倍，得率為1.76％。經(jīng)質(zhì)譜測定plan

4、taricin ZJ217的分子量為2632.537 Da。采用Edman法進(jìn)行N端測序，獲得了plantaricinZJ217的部分氨基酸序列:NLPQLTQTLVVAPPF。
　　3.Plantaricin ZJ217具有良好的生物學(xué)特性，不僅可耐受pH值2～8的環(huán)境條件，而且具有良好的熱穩(wěn)定性，在121℃處理30 min仍可保留80％以上的活力。plantaricin Z J217對胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶敏感，對蛋白

5、酶K部分敏感。37℃培養(yǎng)植物乳桿菌ZJ217，細(xì)菌素在對數(shù)期開始產(chǎn)生，產(chǎn)量在穩(wěn)定期達(dá)到最大值，隨后保持穩(wěn)定。
　　4.Plantaricin ZJ217屬于廣譜細(xì)菌素，抑菌譜包括革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌，如惡臭假單胞菌、枯草芽孢桿菌、單增李斯特氏菌、福氏志賀氏菌、檸檬色葡萄球菌、大腸桿菌等。通過對細(xì)菌素作用后的指示菌恢復(fù)生長情況觀察，發(fā)現(xiàn)plantaricin ZJ217的作用模式為殺菌。通過測定指示菌細(xì)胞內(nèi)K+的泄漏，發(fā)現(xiàn)pl