腸道病毒71型3B蛋白類似物和3C蛋白酶底物的設(shè)計(jì)與合成.pdf

1、手足口病是嬰幼兒常見的傳染病，臨床上以發(fā)熱、咽炎和手、足、口腔等部位出現(xiàn)皮疹、潰瘍等表現(xiàn)為主，個(gè)別患者可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等致命性并發(fā)癥。手足口病是全球性傳染病，世界大部分地區(qū)均有此病流行的報(bào)導(dǎo)，已經(jīng)引起了全世界的普遍關(guān)注。腸道病毒71型是引起手足口病的重要病原體之一，屬于小核糖核酸病毒科。目前已經(jīng)有疫苗處于臨床研究階段，但仍沒有有效的藥物能夠很好的治療腸道病毒71型引起的疾病。
　　3B蛋白(VPg)在腸道病毒7

2、1型RNA的復(fù)制合成中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。3B蛋白是腸道病毒71型進(jìn)行RNA復(fù)制的病毒編碼蛋白，其作為一種引物，開啟了RNA的復(fù)制過程。腸道病毒71型的3B蛋白由22個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成:GAYSGAPKQVLKKPALRTATVQ。3B蛋白中的酪氨酸通過與RNA基因中的UMP末端形成磷酸二酯鍵，能夠與新合成的病毒RNA的5'末端形成共價(jià)結(jié)合。然而到目前為止，3B蛋白具體的作用機(jī)制還仍然尚不明確。
　　本課題通過用苯丙氨酸替代酪氨酸

3、，合成出四肽片段:GAFS，七肽片段:GAFAGAP,十肽片段:KPALRTATVQ。結(jié)果發(fā)現(xiàn)四肽和七肽具有較差的活性，而十肽片段顯示良好的活性。用固相合成方法嘗試合成一系列的十肽序列。目前生物活性測(cè)試仍在進(jìn)行，還沒有得到具體的生物活性測(cè)試結(jié)果。
　　3C蛋白酶是特異性蛋白酶，負(fù)責(zé)特異性地切割蛋白，在病毒復(fù)制過程中發(fā)揮著極其重要的作用。利用能量共振轉(zhuǎn)移的方法，在多肽片段中加入熒光基團(tuán)NMA和熒光淬滅基團(tuán)DNP，針對(duì)3C蛋白酶的特異