復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、選題依據(jù)：抑郁癥是10種重大疾病之一的一種常見精神疾病。精神疾病的發(fā)病率隨著社會(huì)的發(fā)展也在上升。由于經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和工作壓力的加大，抑郁癥的發(fā)病率隨著周圍環(huán)境的干擾呈逐年上升趨勢(shì)。抑郁癥對(duì)人們的生活造成的危害引起了醫(yī)藥衛(wèi)生界的高度重視?！爸卮笮滤帉ｍ?xiàng)”是一項(xiàng)由中國(guó)科技部主持的大型科技計(jì)劃，主要是為了突破國(guó)內(nèi)現(xiàn)有科技水平，滿足人民群眾基本的用藥需求，督促醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的快速安全發(fā)展。通過借鑒國(guó)內(nèi)外主要科技手段解決藥物創(chuàng)制中關(guān)鍵的技術(shù)和方法，解決國(guó)內(nèi)藥

2、品所存在的安全性以及質(zhì)量可靠性等問題。藥物研發(fā)所獲得產(chǎn)品的自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)使得企業(yè)在市場(chǎng)中占有更大的份額，進(jìn)而提高企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力?！爸卮笮滤巹?chuàng)制”專項(xiàng)項(xiàng)目“創(chuàng)新藥物研究開發(fā)”是針對(duì)嚴(yán)重危害人民健康的10類（種）重大疾病，通過自主研發(fā)，獲得一批擁有自主產(chǎn)權(quán)，市場(chǎng)占有量大，安全性高，治療效果好，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的創(chuàng)新品種。研發(fā)抗抑郁創(chuàng)新藥物屬于重大專項(xiàng)支持范圍。
　　本課題組針對(duì)西藥治療抑郁癥中存在的副作用大的問題，在科技部國(guó)合重大項(xiàng)目及3個(gè)國(guó)家基金

3、資助下，從經(jīng)典名方逍遙散及其類方中篩選并確定了逍遙散是最佳抗抑郁復(fù)方，通過對(duì)逍遙散最佳抗抑郁藥效組分進(jìn)行篩選，明確了逍遙散中低極性組分抗抑郁活性最強(qiáng)。通過化學(xué)研究和藥效驗(yàn)證，化裁了逍遙散中的白芍和茯苓兩味藥材，得到了復(fù)方柴歸方(由柴胡、當(dāng)歸、白術(shù)、生姜、薄荷、炙甘草組成)抗抑郁處方。本研究從化學(xué)角度進(jìn)一步論證了復(fù)方柴歸方處方的合理性；從工藝可行性角度確定了復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分的制備工藝；最后對(duì)有效組分進(jìn)行有效的質(zhì)量控制。
　　

4、目的：1.為了最大限度的提取復(fù)方柴歸方中抗抑郁有效組分，減少患者的服用劑量，提高療效，并且應(yīng)用于生產(chǎn)研究中，本實(shí)驗(yàn)在復(fù)方柴歸方確切的抗抑郁藥效基礎(chǔ)上，論證處方的合理性，確定有效組分的制備工藝。2.本研究通過建立復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分的指紋圖譜，指認(rèn)出主要化學(xué)物質(zhì)的藥材來源，同時(shí)建立藥效指標(biāo)成分的含量測(cè)定方法，對(duì)復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分的質(zhì)量進(jìn)行控制。3.建立復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為制劑研究提供質(zhì)量穩(wěn)定可控的中間產(chǎn)品給

5、予保證。
　　方法：1.通過分析逍遙散全方有效組分的1HNMR指紋圖譜和抗抑郁的相關(guān)性，明確逍遙散全方中與抗抑郁藥效密切相關(guān)的物質(zhì)；基于逍遙散全方1HNMR指紋圖譜譜效關(guān)系的研究結(jié)果對(duì)復(fù)方柴歸方處方進(jìn)行研究，從化學(xué)角度說明處方的合理性；2.以出膏率、阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量為指標(biāo)，優(yōu)選復(fù)方柴歸方的工藝路線；3.采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)制備工藝中的各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，全面考察了乙醇的用量、浸泡時(shí)間、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)對(duì)出膏率、阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ

6、含量的影響；考察了乙酸乙酯用量、萃取次數(shù)、攪拌時(shí)間對(duì)出膏率、阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ含量的影響，明確了最優(yōu)工藝參數(shù)；4.建立有效組分的HPLC指紋圖譜，結(jié)合復(fù)方柴歸方單味藥材中主要化學(xué)成分的對(duì)照品對(duì)有效組分HPLC指紋圖譜中的主要色譜峰進(jìn)行定性識(shí)別，建立藥效活性成分阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量測(cè)定方法；5.依據(jù)國(guó)家藥典委員會(huì)編寫的《中國(guó)藥典》中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)起草說明編寫細(xì)則中的相關(guān)項(xiàng)目要求，對(duì)提取物從性狀、鑒別、檢查、含量測(cè)定等方面的進(jìn)行相應(yīng)的質(zhì)量控

7、制。
　　結(jié)果：1.明確了復(fù)方柴歸方中發(fā)揮抗抑郁藥效的化學(xué)物質(zhì)主要來源于柴胡、當(dāng)歸和白術(shù)，選取了阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ作為抗抑郁有效組分質(zhì)量控制的指標(biāo)；從化學(xué)角度論證了復(fù)方柴歸方處方（柴胡30g，當(dāng)歸30g，白術(shù)30g，甘草20g，生姜10g，薄荷10g）的合理性；2.確定了抗抑郁有效組分的制備工藝：復(fù)方柴歸方處方量藥材加8倍量的75％乙醇，浸泡30分鐘，提取1.5小時(shí)，提取2次；提取液濃縮至定量，1倍量的乙酸乙酯萃取2次，每次攪拌1

8、小時(shí)。3.指認(rèn)出復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分HPLC指紋圖譜中的8個(gè)峰，計(jì)算不同批次樣本的HPLC指紋圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜之間的相似度，相似度均達(dá)到0.8以上。4.在復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分質(zhì)量控制方面，建立了生姜和薄荷的TLC鑒別，建立了阿魏酸和白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的含量測(cè)定方法，為制劑研究奠定了基礎(chǔ)。
　　結(jié)論：1.化學(xué)角度論證了處方的合理性，獲得了最佳工藝，為工業(yè)生產(chǎn)提供可靠的工藝參數(shù)。2.建立了復(fù)方柴歸方抗抑郁有效組分的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。含量測(cè)定體現(xiàn)