赤霉素GA3的高效液相色譜檢測方法及對小鼠機體的氧化損作用研究.pdf

1、本研究在現(xiàn)有方法的基礎上優(yōu)化了色譜條件和樣品前處理過程,建立了一種快速、精確的赤霉素(GA3)檢測分析方法及簡便的樣品前處理方法,并對部分市售果蔬樣品進行殘留量分析檢測,為我國制定相關標準、保障食品安全提供參考。另外,本文通過研究GA3對小鼠不同臟器的氧化損傷作用,探討了GA3對機體的毒作用機制。結果如下:
　　 1.優(yōu)化的色譜條件；
　　 HPLC條件為鍵合固定相C18反相柱,紫外檢測器,檢測波長206nm,流動相為甲

2、醇與7.5mM甲酸水的體積比為4:6的溶液,流速0.4ml／min,柱溫40℃,進樣量10μL經(jīng)過反復調試流動相的組成和流速,樣品保留時間穩(wěn)定,具有更好的峰形。
　　 2.樣品前處理方法；
　　 采用丙酮-水提取劑結合超聲波萃取法提取GA3；并通過石油醚脫色、乙酸乙酯萃取結合C18固相萃取小柱吸附對樣品進行提純。與其他方法相比,除雜效果好,待測樣品純凈度高,省時。
　　 3.部分市售果蔬GA3殘留情況；
　

3、　 一些早熟果蔬品種和芽菜類GA3殘留量較高,黃豆芽和早熟葡萄最為嚴重,分別達到3.17mg／kg和2.3mg／kg,超出了歐美國家殘留標準。
　　 4.GA3對小鼠體質量的影響及對脾臟、肝臟、腎臟和心臟組織的氧化損傷作用；
　　 (1)對臟／體比的影響；
　　 染毒后各組間體質量無顯著性差別；788mg／kg bw劑量組肝體系數(shù)顯著低于溶劑對照組(P<0.05),說明該劑量的GA3對小鼠肝臟有一定的影響；與溶

4、劑對照組相比,染毒組體質量和心、腎體系數(shù)無統(tǒng)計學意義；脾體系數(shù)隨著劑量的增高出現(xiàn)上升趨勢,但無統(tǒng)計學意義。
　　 (2)對肝臟和脾臟的影響；
　　 在394和788mg／kg bw劑量條件下,脾臟和肝臟的各氧化應激指標改變明顯。脾臟SOD、GSH-Px活性分別比對照組降低了21.01％,29.02％和23.36％,35.03％,肝臟相應指標分別降低了9.01％,13.05％和12.81％,16.17％,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異顯

5、著(P<0.05,P<0.01)；相同劑量組的MDA含量,脾臟和肝臟分別升高了19.06％,23.61％和22.33％,26.39％,經(jīng)統(tǒng)計學處理差異顯著(P<0.05,P<0.01)。
　　 (3)對腎臟的影響；
　　 394和788mg／kg bw兩個染毒劑量,使腎臟SOD、GSH-Px活性有所上升,與對照組相比,分別上升了22.34％和40.20％；MDA含量有所下降,與對照組相比分別下降了35.93％和30.05

6、％。結果均具有統(tǒng)計學意義。
　　 (4)對心臟的影響；
　　 染毒組的各項指標與陰性對照和溶劑對照組比較均無顯著性差異(P>0.05)。
　　 結論:本研究所建立的果蔬GA3殘留檢測方法線性良好,相關系數(shù)大于0.999,平均加標回收率為93.10％,最低檢測限為0.012μg／g,一些早熟果蔬品種和芽菜類GA3殘留量較高；GA3對小鼠不同組織器官的氧化應激表現(xiàn)不同,對肝臟、脾臟有氧化損傷作用,對心臟作用不明顯,對