兩棲類抗菌肽Temporin--1CEa對人乳腺癌SK--BR3細(xì)胞作用機(jī)制的研究.pdf

1、分類號：密級：學(xué)校代碼：10165學(xué)號：201111037遣掌彥可耗大學(xué)碩士學(xué)位論文②兩棲類抗菌肽Temporin1CEa對人乳腺癌SK—BR3細(xì)胞作用機(jī)制的研究作者姓名：學(xué)科、專業(yè)：研究方向：導(dǎo)師姓名：英馨月有機(jī)化學(xué)多肽生物化學(xué)王澈副教授尚德靜教授2014年O5月遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要乳腺癌是威脅人類身心健康的一個(gè)重大殺手，近年來研究表明，乳腺癌分為多種類型，其中HER2過表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞因惡性程度高、生存率低而成為當(dāng)前研究的重

2、點(diǎn)。目前針對這種抗原的單克隆抗體藥物已經(jīng)上市，而部分患者用藥初期就出現(xiàn)了耐藥性，所以研究和開發(fā)針對此類乳腺癌的藥物成為當(dāng)前的熱點(diǎn)。本論文研究所用的SKBR3細(xì)胞就是一種HER2過表達(dá)的乳腺癌細(xì)胞?？咕囊蚱渚哂蟹肿恿啃?、熱穩(wěn)定性高、強(qiáng)陽離子性等特點(diǎn)成為近年來國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。Temporin1CEa是從林蛙皮膚分泌物中提取的一種Q螺旋抗菌肽，具有很好的抗癌活性。本論文主要探討抗菌肽Temporin1CEa對人乳腺癌SKBR3細(xì)胞的作用機(jī)

3、制。首先通過MTT法和LDH法檢測Temporin1CEa對人乳腺癌SKBR3細(xì)胞的抑制作用及細(xì)胞毒性，AnnexinV／PI雙染法檢測Temporin1CEa對SKBR3細(xì)胞的作用方式，并利用掃描電鏡觀察Temporin1CEa作用后細(xì)胞的形態(tài)變化。最后用DiBAC4(3)、Rhodaminel23、Flu03AM和活性氧試劑盒分別檢測細(xì)胞的跨膜電位、線粒體膜電位、以及細(xì)胞內(nèi)活性氧水平和[Caz]濃度的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Tempori

4、n1CEa對SKBR3細(xì)胞具有抑制作用和細(xì)胞毒性，而且隨著濃度的增加抑制作用及毒性增強(qiáng)，與時(shí)間無明顯關(guān)聯(lián)。掃描電鏡觀察Temporin1CEa作用于SKBR3細(xì)胞后，細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生了變化，濃度越大細(xì)胞破損越嚴(yán)重，由完整變?yōu)榘枷荩詈笞兂伤槠?。DiBAC4(3)和Rhodaminel23檢測結(jié)果表明，Temporin1CEa作用SKBR3細(xì)胞后，細(xì)胞膜的跨膜電位升高，發(fā)生去極化現(xiàn)象導(dǎo)致膜的通透性增強(qiáng)。而且細(xì)胞線粒體膜電位下降，說明線粒體膜