伏馬菌素吸附菌株的篩選及機(jī)理初探.pdf

1、伏馬菌素(Fumonisins，F(xiàn)Bs)是一組主要由多育鐮刀菌、串珠鐮刀菌等產(chǎn)生的水溶性的真菌毒素。迄今為止，28種伏馬菌素已經(jīng)被分離鑒定，其中伏馬菌素B1(FB1)和伏馬菌素B2(FB2)在自然界中存在廣泛，毒性最強(qiáng)。作為世界主要農(nóng)作物，玉米是谷物食品和飼料的主要來源之一，因而存在于玉米及其相關(guān)食品中的伏馬菌素污染已引起世界各國(guó)廣泛關(guān)注，如何去除玉米及其相關(guān)制品中伏馬菌素的技術(shù)和方法也日益受到人們的重視。然而，采用生物方法去除伏馬菌素

2、的報(bào)道尚不多見。本論文采用乳桿菌菌株與伏馬菌素的共培養(yǎng)技術(shù)，通過ELISA和HPLC相結(jié)合方式檢測(cè)菌體細(xì)胞吸附FB1和FB2的效果，評(píng)價(jià)了48株菌對(duì)FB1和FB2脫除能力，從中篩選出具有較高FB1和FB2吸附率的植物乳桿菌（Lactobacillusplantarum）ZJ8和戊糖乳桿菌（Lactobacilluspentosus）X5。并在此基礎(chǔ)上，探討了不同物理因素和不同處理?xiàng)l件下乳桿菌吸附FB1和FB2的特性，分析了伏馬菌素對(duì)乳桿

3、菌生長(zhǎng)的影響，探索了乳桿菌吸附FB1和FB2的機(jī)制,旨在為利用乳桿菌生物脫除伏馬菌素方面的研究與應(yīng)用提供參考與理論依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　1、乳桿菌ZJ8和X5有很強(qiáng)的結(jié)合伏馬菌素的能力，2株菌對(duì)FB1的吸附率分別為89.9％和86.0％，對(duì)FB2吸附率分別為95.0％和93.1％。乳桿菌吸附FB2的效果普遍高于吸附FB1的效果。菌株ZJ8和X5在吸附FB1和FB1方面無交互作用，無競(jìng)爭(zhēng)性抑制，表明吸附FB1和FB1的結(jié)合位點(diǎn)不

4、同。
　　2、培養(yǎng)時(shí)間、pH和溫度影響菌株吸附伏馬菌素的效果。乳桿菌菌株ZJ8和X5結(jié)合FB1和FB2的效果隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而增加。當(dāng)pH為4時(shí)，2株菌對(duì)FB1和FB2的吸附率均達(dá)最大，堿性條件不利于菌株吸附伏馬菌素。高溫降低了菌株吸附伏馬菌素的效果。進(jìn)一步的，5～10μg/mL的附伏馬菌不會(huì)顯著影響2株乳桿菌的生長(zhǎng)，同時(shí)菌體細(xì)胞在吸附FB1和FB2后其活性也不會(huì)受到影響。
　　3、菌株對(duì)伏馬菌素的吸附與菌體活力無關(guān)。強(qiáng)酸和T

5、CA處理后菌株對(duì)FB1和FB2的吸附率顯著提升，而SDS處理后菌株對(duì)FB2的吸附率吸附率顯著提升，對(duì)FB1的吸附能力影響不大。溶菌酶處理后2株菌吸附FB1的能力顯著下降，而吸附FB2的能力顯著提升。胰蛋白酶處理后菌株表現(xiàn)差異性，處理后2株菌吸附FB1的能力都顯著下降，但菌株ZJ8吸附FB2的能力無顯著性變化，對(duì)菌株X5吸附吸附FB2的能力顯著提升。
　　4、細(xì)胞壁是菌株結(jié)合伏馬菌素的主要部位。2株菌的細(xì)胞壁對(duì)FB1的吸附率分別達(dá)到

6、96.8％和96％，對(duì)FB2的吸附率均達(dá)到100％。去除菌體細(xì)胞壁后，其原生質(zhì)體對(duì)FB1的吸附率不到13％，對(duì)FB2的吸附率不到19％。而無細(xì)胞提取物對(duì)FB1和FB2的吸附率均不足5％。進(jìn)一步地，2株乳桿菌胞壁成分中肽聚糖對(duì)FB1的吸附率分別為98.4％和97.8％，對(duì)FB2的吸附率達(dá)100％，表明菌體細(xì)胞壁上的肽聚糖是吸附伏馬菌素B1和B2的最主要成分。
　　綜上，篩選到的2株乳桿菌具有很強(qiáng)的結(jié)合伏馬菌素的能力，或許可以用作一種