烏司他丁對兔急性百草枯中毒的心肌保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、第一部分:烏司他丁對兔急性百草枯中毒心肌損傷的保護(hù)作用
　　 目的:
　　 探討烏司他丁(UTI)對急性百草枯中毒所致兔心肌損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法:
　　 將24只健康日本大耳白兔按隨機(jī)數(shù)字表法分為對照組,模型組(腹腔注射百草枯37 mg/kg1次),UTI低和高劑量組(染毒前1周開始分別靜脈注射UTI25kU·kg-1·d-1、50 kU·kg-2·d-1,共9d)4組。于末次給藥后24h稱

2、重并處死動物,取左心室組織,測定羥脯氨酸(HYP)的含量:用逆轉(zhuǎn)錄.聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)監(jiān)測基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、金屬蛋白酶組織抑制劑2(TIMP-2)轉(zhuǎn)錄水平;行免疫組化染色,觀察心肌形態(tài)學(xué)及MMP-2蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 與對照組相比,模型組心肌HYP含量(μg/mg)明顯增高(3.85±0.36比2.52±0.29,P＜0.05):心肌細(xì)胞MMP-2 mRNA表達(dá)及免疫組化評分(分)明顯

3、增高(2.07±0.57比1.00±0.35,2.24±0.82比1.40±0.62,均P＜0.05),同時TIMP-2呈下降趨勢(0.78±0.24比1.00±0.17,P＞0.05);組織形態(tài)學(xué)顯示心肌排列紊亂。與模型組相比,UTI低、高劑量組心肌HYP含量降低(3.40±0.48、3.12±0.43比3.85±0.36,P＞0.05和P＜0.05);MMP-2 mRNA表達(dá)和免疫組化評分明顯降低(mRNA:1.86±0.44、1.

4、58±0.46H52.07±0.57,P＞0.05和P＜0.05;免疫組化評分:1.93±0.86、1.75±0.67比2.24±0.82,均P＜0.05);而TIMP-2 mRNA表達(dá)升高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0.82±0.35、0.94±0.33比0.78±0.24,均P＞0.05);且心肌纖維排列紊亂程度減輕。
　　 結(jié)論:
　　 UTI具有改善急性百草枯中毒致心肌功能障礙及心肌間質(zhì)纖維化的作用,這一作用與其下調(diào)M

5、MP-2水平有關(guān)。
　　 第二部分:烏司他丁減輕百草枯所致兔心肌氧化應(yīng)激損傷——自身保護(hù)因素在其中的表現(xiàn)
　　 目的:
　　 探討UTI對兔急性百草枯中毒所致心肌氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法:
　　 30只日本大耳白兔隨機(jī)分配至5組:A組,空白對照;B、C、D、E組均通過腹腔注射總劑量為30mg/kg百草枯,C、D、E三組分別應(yīng)用15000、30000、50000U/kg烏司他丁(U

6、TI)干預(yù)7天。于麻醉中取動物左心室。行HE及4-HNE免疫組化染色,測定組織羥脯氨酸(HYP)含量,應(yīng)用RT-PCR檢測TGF-β1、adiponectin、PPAR-α、AMPK-β1、UCP-1 mRNA水平。
　　 結(jié)果:
　　 PQ致心肌排列紊亂,心肌HYP含量增高,4-HNE免疫組化評分增高,TGF-β1轉(zhuǎn)錄增多,PPAR-α、AMPK-β1 mRNA水平降低。應(yīng)用UTI干預(yù)后,與PQ模型組相比,心肌HYP含

7、量均降低(all p＜0.05),4-HNE免疫組化評分呈現(xiàn)隨UTI劑量增加而下降趨勢(all p＜0.01),UTI改善心肌脂質(zhì)過氧化;且TGF-β1轉(zhuǎn)錄水平在UTI干預(yù)的D、E兩組中顯著低于PQ模型組(t=11.024,p＜0.01;t=14.697,p＜0.01)。心肌內(nèi)PPAR-α及UCP-1兩基因轉(zhuǎn)錄水平于D組中高于正常組(t=18.708,p＜0.01;T=180,p＜0.01),在E組中增高更為顯著(all p＜0.01)