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文檔簡介
1、醋酸菌屬于好氧性的細菌,研究發(fā)現(xiàn)醋酸菌可以通過代謝作用將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸。因其特有的轉(zhuǎn)化能力以及大量分布于自然界各處,在工業(yè)生產(chǎn)食用醋的發(fā)酵工藝中起著至關(guān)重要的作用。
在本文涉及到的實驗中,從蘋果、芒果、香蕉、橙子、蘋果梨、西紅柿等6種水果和蔬菜樣品以及延邊大學(xué)后山蘋果梨根部土壤樣品、龍井蘋果梨果樹根部土壤樣品中分離出516種微生物,其中通過溴甲酚紫培養(yǎng)基法篩選出醋酸菌223種。
由于YEGA培養(yǎng)基中含有溴甲酚紫,在醋
2、酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化為乙酸時形成的酸環(huán)境,促使紫色的溴甲酚紫變成黃色,在菌株周圍形成黃色條帶。周圍生成黃色條帶的醋酸菌株經(jīng)過分離、純化等實驗步驟得到單一的醋酸菌菌株。
通過對不同發(fā)酵溫度、菌株接種量、初始酒精濃度、反應(yīng)容器中發(fā)酵液的體積等條件進行正交分析,進一步篩選出能產(chǎn)生高濃度乙酸的高效醋酸菌,并進行發(fā)酵條件優(yōu)化。
通過發(fā)酵用培養(yǎng)基的選定、培養(yǎng)基成分的價格、發(fā)酵溫度的高低、初始發(fā)酵 pH等條件綜合考慮、計算,最終選出能在
3、物美價廉的條件下,短時間內(nèi)達到最高醋酸濃度的高效醋酸菌。
利用海藻酸鈉,對高效醋酸菌進行固定化。探討每一株醋酸菌的最佳固定化條件,并制作高效菌株的醋酸菌載體用于蘋果梨醋的發(fā)酵。在實驗溫度30℃、菌株接種量20%、反應(yīng)容器中發(fā)酵液體積50%、初始酒精濃度8%的條件下連續(xù)震蕩發(fā)酵發(fā)現(xiàn),從土壤樣品中分離出的菌株AAB-13和AAB-14產(chǎn)酸能力最為突出,AAB-13的最高產(chǎn)酸量為7.7%、AAB-14最高產(chǎn)酸量為7.8%。
4、 對高效菌株進行了DNA測序鑒定,并根據(jù)測序結(jié)果構(gòu)建了無根系統(tǒng)發(fā)育樹,結(jié)合形態(tài)學(xué)確定了菌株AAB-13菌株屬于葡萄糖桿菌屬(Gluconacetobacter),菌株AAB-14屬于醋酸桿菌(Acetobacter)。
利用高效菌株AAB-13和AAB-14的固定化載體,按照最佳反應(yīng)條件進行二段式的連續(xù)發(fā)酵10個周期。結(jié)果發(fā)現(xiàn),屬于醋酸桿菌(Acetobacter)的AAB-14在連續(xù)發(fā)酵過程中出現(xiàn)了醋酸的過氧化反應(yīng)。發(fā)酵達到
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