不同分子量海帶巖藻聚糖硫酸酯消化吸收、免疫及抗病毒活性的比較研究.pdf

1、巖藻聚糖硫酸酯是褐藻中特有的一種以巖藻糖為主構(gòu)成的水溶性硫酸多糖，具有較好的生物活性。但是不同分子量海帶巖藻聚糖硫酸酯的化學(xué)組成、結(jié)構(gòu)和生物活性差異較大，且高分子量的海帶巖藻聚糖硫酸酯的消化吸收受到質(zhì)疑。因此，明確分子量大小對(duì)海帶巖藻聚糖硫酸酯消化吸收和生物活性的影響對(duì)海帶巖藻聚糖硫酸酯功能性產(chǎn)品的開發(fā)及海帶的高值化利用具有重要意義。以此為背景，本文以海帶巖藻聚糖硫酸酯粗多糖為原料，對(duì)不同分子量海帶巖藻聚糖硫酸酯的化學(xué)組成及活性進(jìn)行了系

2、統(tǒng)研究。本文研究的內(nèi)容包括以下幾部分：
　　 1.采用不同制備方法得到的不同分子量海帶巖藻聚糖硫酸酯(海帶-Fucoidan)的化學(xué)組成研究：通過Q-Sephrose FF陰離子色譜柱分級(jí)純化和自由基氧化降解法制備出了中、低不同分子質(zhì)量組分的巖藻聚糖硫酸酯，同時(shí)測(cè)定其分子量、硫酸根含量和單糖組成等化學(xué)指標(biāo)。確定了中分子量巖藻聚糖硫酸酯的適宜分級(jí)洗脫濃度，分別為1mol/LNaCl和2.5mol/LNaCl，以這兩種濃度分別得到F

3、-1(26kDa_)和F-2(34kDa)組分，硫酸根含量分別為13.44％和29.57％；通過比較粗糖質(zhì)量和H2O2濃度對(duì)產(chǎn)物的分子量和化學(xué)組成的影響，確定了制備高硫酸根高巖藻糖的低分子量巖藻聚糖硫酸酯的最佳條件是：4.5％H2O2與0.0267mol/LCu2+降解4.5g巖藻聚糖硫酸酯，得到Fa3(Mw7.68kDa)和Fb3(Mw3.89kDa)兩個(gè)組分，其硫酸根含量較高，分別為30.32％和32.48％。Fa3組分主要由巖藻糖

4、(64.25％)和半乳糖(30.74％)組成，而Fb3的硫酸根和半乳糖含量高于Fa3，但巖藻糖含量下降。
　　 2.血清單糖含量測(cè)定方法的建立：驗(yàn)證了PMP-HPLC法可準(zhǔn)確的測(cè)定血清單糖組成。該方法靈敏、準(zhǔn)確，且重現(xiàn)性好，所受干擾因素少，可以滿足對(duì)大鼠血清巖藻糖含量進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。同時(shí)還可以定量檢測(cè)血清樣品中含有的：甘露糖、氨基半乳糖、氨基葡萄糖、葡萄糖以及半乳糖其他的這5種單糖。采用PMP-HPLC法測(cè)得血清巖藻糖加標(biāo)回

5、收率在102.7％～105.3％之間，RSD為1.31％。
　　 3.不同分子量海帶-Fucoidan的消化吸收特性：采用PMP-HPLC法，研究了在大鼠體內(nèi)不同分子量海帶-Fucoidan的消化吸收特性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明中分子質(zhì)量和中電荷密度的海帶-Fucoidan以及低分子量的海帶-Fucoidan口服后均能被大鼠吸收，但是中分子量的吸收速度較緩慢，血清巖藻糖的變化趨勢(shì)不明顯；而經(jīng)自由基降解后的低分子量組分其吸收速度大大升高?？?/p>

6、以得出結(jié)論：分子量大小可以影響多糖的吸收效果，且吸收效率大致與分子量成反比，分子量越低，其吸收效率越高。
　　 4.不同分子量海帶-Fucoidan的免疫調(diào)節(jié)作用：采用給小鼠灌胃不同分子量的海帶-Fucoidan組分，得出中、低分子質(zhì)量的海帶巖藻聚糖硫酸酯組分均能顯著提高免疫低下小鼠的脾臟/體質(zhì)量比值，提高血清溶血素含量和提高腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞能力，以及增強(qiáng)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力。海帶巖藻聚糖硫酸酯對(duì)免疫低下小鼠具有較好的免疫

7、調(diào)節(jié)作用，且中、低分子質(zhì)量的巖藻聚糖硫酸酯對(duì)免疫低下小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用沒有顯著性差異。
　　 5.不同分子量海帶-Fucoidan體外抑制流感病毒神經(jīng)氨酸酶的作用：通過體外實(shí)驗(yàn)，得出不同分子量海帶-Fucoidan組分均具有較好的抑制流感病毒神經(jīng)氨酸酶活性的作用，但中分子量組分的抑制活性明顯高于低分子量組分。
　　 綜上，比較研究不同分子量海帶巖藻聚糖硫酸酯的消化吸收特性、免疫以及抗流感病毒活性，不僅為深入研究分子量、結(jié)