2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、海參巖藻聚糖硫酸酯是海參體壁中重要的活性硫酸多糖,具有抗腫瘤、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、降血糖和降血脂等廣泛的藥理活性,其活性受多糖支鏈和硫酸根含量等結(jié)構(gòu)影響。其中,美國(guó)肉參巖藻聚糖硫酸酯是一類(lèi)具有很高粘度和較高相對(duì)分子量的直連硫酸多糖,使用TSK G4000PWXL色譜柱測(cè)定其分子量達(dá)435KDa。PMP法測(cè)定單糖組成,分析其單糖僅含有巖藻糖。離子色譜法測(cè)定其硫酸基含量約為32.9%。本實(shí)驗(yàn)以美國(guó)肉參巖藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)為研究對(duì)象,

2、通過(guò)建立體外化學(xué)缺氧模型和體內(nèi)自發(fā)肺轉(zhuǎn)移模型,系統(tǒng)地評(píng)價(jià)了SC-FUC抗腫瘤活性及初步探討了其作用機(jī)制。主要研究結(jié)果如下:
   采用MTT法對(duì)不同分子量海地瓜SC-FUC低聚糖和美國(guó)肉參SC-FUC的體外抗腫瘤活性進(jìn)行了篩選。結(jié)果顯示,不同分子量的海地瓜SC-FUC低聚糖對(duì)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用不同,多種腫瘤細(xì)胞株對(duì)海地瓜SC-FUC低聚糖的作用不敏感;美國(guó)肉參SC-FUC具有顯著抑制腫瘤細(xì)胞增殖活性的作用,人胃癌H

3、GC-27細(xì)胞對(duì)其作用最為敏感,72和96h的IC50值分別為399.74和126.97μg/mL,具有時(shí)間和劑量效應(yīng)關(guān)系。
   以HGC-27細(xì)胞為研究對(duì)象,采用MTT法和RT-PCR法篩選化學(xué)缺氧誘導(dǎo)劑CoCl2誘導(dǎo)HGC-27細(xì)胞的缺氧濃度,建立化學(xué)缺氧模型。結(jié)果表明:25μMCoCl2對(duì)HGC-27細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)顯著影響,且細(xì)胞HIF-1α mRNA的表達(dá)量較高,故以濃度為25μM的CoCl2建立缺氧模型。
  

4、 采用MTT、AO/EB染色、TUNEL和RT-PCR法及Western blotting法對(duì)缺氧條件下SC-FUC體外抗腫瘤活性及其可能機(jī)制進(jìn)行了探討。結(jié)果表明:SC-FUC能顯著抑制缺氧誘導(dǎo)的HGC-27細(xì)胞的增殖活性(72和96h的IC50值分別為169.85和100.04μg/ml),改變細(xì)胞的周期,形成G2/M期阻滯,并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。RT-PCR和Western blotting法實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,SC-FUC能下調(diào)HIF-1

5、α及其介導(dǎo)的Bc1-2、Bc1-x1的表達(dá),上調(diào)Bax、細(xì)胞色素c并caspase3的表達(dá),增加PARP-1的裂解。提示SC-FUC具有顯著抑制缺氧條件下腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的活性,其作用機(jī)制可能與阻滯細(xì)胞周期,并通過(guò)HIF-1α及其介導(dǎo)的線粒體信號(hào)通路激活腫瘤細(xì)胞的凋亡相關(guān)。
   通過(guò)研究SC-FUC對(duì)缺氧誘導(dǎo)的HGC-27細(xì)胞轉(zhuǎn)移活性及其作用機(jī)制,結(jié)果表明,SC-FUC可顯著抑制缺氧條件下腫瘤細(xì)胞的遷移(P<0.01)、粘附(P<

6、0.05,P<0.01)和侵襲能力(P<0.01)。在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平上,RT-PCR和Western blotting法結(jié)果表明,SC-FUC可下調(diào)Hpa和HIF-1α及其介導(dǎo)的MMP-2/-9的表達(dá),上調(diào)TIMP-2/-1的表達(dá),從而通過(guò)降低腫瘤細(xì)胞外基質(zhì)的侵襲能力而發(fā)揮抗轉(zhuǎn)移作用。
   采用MTT法、體外小管形成和雞胚尿囊膜實(shí)驗(yàn),研究SC-FUC對(duì)腫瘤血管新生的影響。結(jié)果說(shuō)明SC-FUC能顯著抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和新生血管的

7、生成。RT-PCR和Western blotting檢測(cè)顯示,SC-FUC可以抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGFmRNA和蛋白的表達(dá)。提示SC-FUC可通過(guò)抑制VEGF的活性抑制血管新生。
   通過(guò)建立小鼠Lewis肺癌自發(fā)肺轉(zhuǎn)移模型,進(jìn)一步驗(yàn)證SC-FUC在體內(nèi)抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用。結(jié)果表明,SC-FUC可以顯著抑制荷瘤小鼠腫瘤的生長(zhǎng)和肺轉(zhuǎn)移,平均抑制率分別為45.6%和65.9%;可降低荷瘤小鼠腫瘤組織中HIF-1α、Hpa

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