大米中硒形態(tài)分析方法的建立.pdf

1、　　硒是人體必需的微量元素之一,對(duì)人體和動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要。硒缺乏會(huì)影響人體健康,產(chǎn)生一些疾病,如克山病、大骨節(jié)病等,但硒攝入過多也會(huì)造成硒中毒,因此人體對(duì)硒的攝入必須在一個(gè)限制的范圍。我國(guó)有許多地區(qū)屬于缺硒地區(qū),因而硒強(qiáng)化顯得非常重要。目前市場(chǎng)上有許多硒強(qiáng)化產(chǎn)品,但由于其中硒形態(tài)差異較大,這些富硒產(chǎn)品不一定符合人體需求,因此必須建立一套系統(tǒng)的硒含量與硒形態(tài)檢測(cè)分析方法,以規(guī)范富硒產(chǎn)品市場(chǎng)。
　　本研究中主要是以大米為樣本,

2、建立快速準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便可靠、低成本的硒含量與硒形態(tài)測(cè)定與分析技術(shù)。同時(shí)驗(yàn)證硒在大米中的分布并研究了葉面施硒后硒在富硒稻中的轉(zhuǎn)移,為硒強(qiáng)化的可行性提供科學(xué)依據(jù)。
　　主要研究結(jié)果如下：
　　1.建立了總硒含量的測(cè)定方法(微波消解-原子熒光法)
　　對(duì)原子熒光光度計(jì)的儀器條件進(jìn)行優(yōu)化,最佳測(cè)定條件：5%的鹽酸為載流, 20g/L硼氫化鈉溶液做還原劑,光電倍增管負(fù)高壓260V,燈電流50mA,原子化器高度8mm。并對(duì)微波消

3、解及鹽酸還原的條件這些前處理?xiàng)l件進(jìn)行了優(yōu)化,樣品成分越復(fù)雜,消解所需的試劑也就越多,設(shè)定的程序也就越復(fù)雜,消解所需的時(shí)間也就越久。鹽酸還原的加熱溫度必須低于120℃,所需時(shí)間大概18h左右(包括趕酸時(shí)間)。該法的儀器檢出限為0.8×10-4μg/L ,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.4239%。富硒米粉的加標(biāo)回收率為93%~94%。普通大米硒含量在80~90μg/kg,富硒大米硒含量在150~160μg/kg。其中米糠中硒含量最高,其次是稻殼與

4、米粉。
　　2.研究了水稻的富硒效應(yīng)
　　運(yùn)用微波消解-原子熒光法測(cè)定富硒水稻植株各部位的硒含量,對(duì)水稻的富硒效應(yīng)進(jìn)行研究。根須中硒含量最高,米糠次之,精米粉中硒含量最低。通過葉面施硒,硒從葉面的氣孔進(jìn)入植株內(nèi)部后,由莖進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入稻谷內(nèi)部,同時(shí)根部也對(duì)土壤中的硒進(jìn)行吸收。對(duì)米粉中的淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定,同時(shí)測(cè)定各部分的硒含量,得知蛋白質(zhì)含量很低但是硒卻主要集中在蛋白質(zhì)中。又由于米糠中蛋白含量高于精米,因此稻谷

5、籽粒的米糠中硒含量高于精米。
　　3.建立無機(jī)硒與有機(jī)硒的測(cè)定方法(稀酸提取-原子熒光法)
　　由于無機(jī)態(tài)硒(SE(Ⅳ)、SE(Ⅵ))都屬于水溶性物質(zhì),因此用稀鹽酸進(jìn)行提取,經(jīng)過單因素試驗(yàn)與正交實(shí)驗(yàn)(L9(34))對(duì)提取條件進(jìn)行了優(yōu)化,優(yōu)化后的最佳條件是：鹽酸濃度為0.1mol/L,提取溫度為40℃,提取時(shí)間為8h,料液比4：1。對(duì)富硒米粉進(jìn)行酸提取后再上原子熒光進(jìn)行硒含量測(cè)定,提取液再經(jīng)過鹽酸還原或者微波消解后上機(jī)測(cè)定

6、,可分別獲得SE(Ⅳ)、無機(jī)硒、可溶態(tài)總硒含量,通過差減法獲得SE(Ⅵ)、有機(jī)硒、不溶態(tài)硒、可溶態(tài)有機(jī)硒的含量。利用這一方法驗(yàn)證了硒在富硒大米中主要是以有機(jī)態(tài)存在,SE(Ⅳ)約占總硒含量的16.21%,SE(Ⅵ)約為6.97%,有機(jī)硒約占了76.82%。
　　4.建立有機(jī)硒化合物的測(cè)定方法(柱前衍生-HPLC法)
　　由于有機(jī)硒主要存在于蛋白質(zhì)中,因此對(duì)富硒大米進(jìn)行蛋白質(zhì)的提取,將大米蛋白作為底物可以增加有機(jī)硒化合物的檢