甜菊糖苷的提取條件優(yōu)化及轉(zhuǎn)化菌株篩選.pdf

1、甜菊糖具有高甜度、低熱能、易容解、耐熱和穩(wěn)定等特點(diǎn)，是有益于人體健康的安全糖料，可代替蔗糖、糖精等其他化學(xué)合成的甜味劑，被稱(chēng)為“第三糖源”。本研究通過(guò)對(duì)于浸提法、蒸煮法、微波法、纖維素酶法等方法的對(duì)比和結(jié)合，找到最合適的甜菊醇糖菅的初提方法，對(duì)提高甜葉菊葉片糖苷產(chǎn)率有著十分重要的意義;同時(shí)，通過(guò)物理、化學(xué)等誘變方法誘變藤倉(cāng)赤霉（Gibberella fujikuroi）得到甜菊糖苷轉(zhuǎn)化高效率菌株，以期提高甜菊醇糖苷品質(zhì)。本研究取得的主要

2、結(jié)果如下:
　　 1.建立了甜菊醇糖苷的高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)方法。得到甜菊苷(St)的回歸方程為:y=1.7×106×x-41214，相關(guān)系數(shù)R2=0.9994;萊鮑迪苷A(RA)的回歸方程為:y=1.2×106×x-14925，相關(guān)系數(shù)R2=0.9955。結(jié)果表明，在0.05～0.25mg/mL范圍內(nèi)，甜菊糖苷St和RA的濃度與其峰面積均線(xiàn)性關(guān)系良好，方法可行。
　　 2.采用正交設(shè)計(jì)方法，確定了最優(yōu)蒸煮法為甜

3、菊糖苷最佳提取方法，即在料液比為1∶15下，在90℃加入甜葉菊干葉片，蒸煮提取時(shí)間為90min時(shí)，St及RA的提取量均達(dá)到最高，分別比對(duì)照高24.1％及45.3％。
　　 3.通過(guò)對(duì)于出發(fā)菌株藤倉(cāng)赤霉菌(Gibberella fujikuroi)的生長(zhǎng)曲線(xiàn)繪制，確定出發(fā)菌株的生長(zhǎng)周期為84h，同時(shí)通過(guò)生長(zhǎng)溫度單因素試驗(yàn)確定其最佳生長(zhǎng)溫度為28℃。
　　 4.根據(jù)最佳誘變劑量選擇原則，確定紫外UV誘變的最佳劑量為12W、2