豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白主要抗原表位重組復(fù)制缺陷型腺病毒的黏膜免疫效果評(píng)價(jià).pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(Porcinecircovirustype2，PCV2)是引起圓環(huán)病毒相關(guān)疾病(Porcinecireovirus-associateddisease，PCVAD)的主要病原體，該病已給世界養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究評(píng)價(jià)了豬圓環(huán)病毒2型Cap蛋白主要抗原表位重組復(fù)制缺陷型腺病毒(rAd/Cap/518)的黏膜免疫效果。
　　 將rAd/Cap/518分別經(jīng)滴鼻、肌內(nèi)和口服三種途徑免疫小鼠，無外源基因的空腺

2、病毒(wild-rAd)經(jīng)滴鼻途徑免疫作為對(duì)照組。結(jié)果顯示，rAd/Cap/518經(jīng)肌內(nèi)和滴鼻途徑免疫誘導(dǎo)的血清IgG抗體水平與對(duì)照組抗體水平相比顯著增加(P<0.05)；rAd/Cap/518經(jīng)滴鼻和口服途徑免疫誘導(dǎo)唾液、肺部灌洗液和腸道灌洗液等局部黏膜部位的IgA抗體水平與對(duì)照組相比顯著增加(P<0.05)；rAd/Cap/518經(jīng)三種途徑免疫后CD3+T細(xì)胞百分率均顯著增加(P<0.05)，肌內(nèi)和口服免疫誘導(dǎo)的CD4+T細(xì)胞顯著增

3、加(P<0.05)，而滴鼻免疫誘導(dǎo)的CD8+T細(xì)胞含量顯著增加(P<0.05)；rAd/Cap/518經(jīng)滴鼻免疫能誘導(dǎo)脾臟淋巴細(xì)胞和腸系膜淋巴細(xì)胞中IFN-γ大量分泌表達(dá)；攻毒后各免疫組小鼠體內(nèi)病毒載量與對(duì)照組相比均顯著降低(P<0.05)。綜合結(jié)果表明，rAd/Cap/518經(jīng)肌內(nèi)途徑免疫主要誘導(dǎo)全身性免疫應(yīng)答，而rAd/Cap/518經(jīng)滴鼻和口服途徑免疫均能誘導(dǎo)全身性和局部黏膜免疫應(yīng)答，以滴鼻免疫效果更好。
　　 由于單一抗

4、原誘導(dǎo)的黏膜免疫應(yīng)答通常較弱且持續(xù)時(shí)間短，因此，rAd/Cap/518配合黏膜免疫佐劑將有可能增強(qiáng)免疫應(yīng)答效果。本文選擇了含非甲基化CpG基序(CpGODN)、霍亂菌素B單位(CTB)和多聚肌胞苷酸(Poly(I：C))三種免疫佐劑分別聯(lián)合rAd/Cap/518經(jīng)滴鼻途徑免疫小鼠，結(jié)果表明rAd/Cap/518分別聯(lián)合CpGODN和CTB免疫誘導(dǎo)的血清IgG抗體水平和局部黏膜部位IgA抗體水平顯著高于rAd/Cap/518單獨(dú)免疫組(P

5、<0.05)，而rAd/Cap/518聯(lián)合Poly(I：C)免疫后沒有增加體液免疫應(yīng)答效果(P<0.05)。rAd/Cap/518分別聯(lián)合三種佐劑免疫后小鼠體內(nèi)T細(xì)胞亞群均顯著增加(P<0.05)，同時(shí)CD4+T細(xì)胞內(nèi)IL-2和CD8+T細(xì)胞內(nèi)IFN-γ的含量高于rAd/Cap/518單獨(dú)免疫組；攻毒后各免疫小鼠體內(nèi)病毒載量與rAd/Cap/518單獨(dú)免疫相比均進(jìn)一步降低。本研究我們證明了rAd/Cap/518經(jīng)滴鼻免疫能誘導(dǎo)全身性和局