Graves病腸道菌九的改變-初步探索性研究.pdf

1、目的:通過研究Graves病患者與健康對(duì)照者糞便樣品中的微生物種類及數(shù)量，探索Graves病患者腸道菌群結(jié)構(gòu)是否存差異及差異菌群與該病發(fā)生發(fā)展的關(guān)系。
　　 方法:收集Graves病患者（14例）及健康對(duì)照者（13例）的新鮮糞便作為研究標(biāo)本，根據(jù)年齡、性別匹配入組，用試劑盒提取糞便樣品中的細(xì)菌基因組DNA。根據(jù)細(xì)菌的16SrRNA基因序列設(shè)計(jì)V3區(qū)通用引物，用聚合酶鏈反應(yīng)-變性梯度凝膠電泳法(PCR-DGGE)觀察兩組腸道菌群的

2、差異，找出差異條帶、切膠回收、純化、克隆后進(jìn)行基因測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果經(jīng)NCBIGenBank對(duì)比后確定菌群種類。
　　 結(jié)果:變性梯度凝膠電泳后，Graves患者與健康對(duì)照組可見差異性條帶，各組經(jīng)QuantityOne4.6.2軟件分析發(fā)現(xiàn):第一組實(shí)驗(yàn)樣品中，Graves病組與健康對(duì)照組的腸道菌群多樣性差異無意義(P＞0.05)，Dice相似系數(shù):組間相似度小于兩組組內(nèi)相似度，后經(jīng)聚類分析可見，除G8、G10樣品外，Graves病

3、組與健康對(duì)照組樣品均分別聚為一類;第二組實(shí)驗(yàn)樣品中，Graves病組與健康對(duì)照組的腸道菌群多樣性差異無意義(P＞0.05)，Dice相似系數(shù):組間相似度小于兩組組內(nèi)相似度，除G6樣品外，其他樣品均分別聚為一類;第三組實(shí)驗(yàn)樣品中，Graves病組與健康對(duì)照組的腸道菌群多樣性差異有意義(P＜0.05)，Dice相似系數(shù):組間相似度小于兩組組內(nèi)相似度，后經(jīng)聚類分析可見，除C11樣品外，其他樣品均分別聚為一類。
　　 從腸道菌群多樣性分

4、析來看，Graves病組與健康對(duì)照組的腸道菌群多樣性無顯著差異。聚類分析結(jié)果顯示，Graves病組聚為一類，健康對(duì)照組聚為一類，說明健康對(duì)照組和Graves病組的腸道菌群豐度有所不同，確實(shí)存在差異。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)Graves病人腸道優(yōu)勢(shì)菌群與正常健康組的有所不同，第一組G2～G5樣品第24號(hào)條帶在Graves病腸道菌群中優(yōu)勢(shì)明顯，但在健康對(duì)照組中并未顯示出優(yōu)勢(shì)性，將其切割回收測(cè)序，經(jīng)GenBank比對(duì)后，鑒定為普雷沃菌屬。
　　 結(jié)