新型硫化氫供體和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶熒光探針的研究.pdf

1、硫化氫(H2S)是生物體內(nèi)重要的氣體信號分子，參與多種病理生理過程。維持生物體內(nèi)硫化氫濃度平衡至關重要，硫化氫供體是提供外源性硫化氫的重要工具。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)是生物體內(nèi)重要的水解酶，催化谷氨?；鶑墓入赘孰幕蛘吆泄劝滨；衔镛D(zhuǎn)移到受體分子，其異常表達與腫瘤、糖尿病等疾病狀態(tài)有關。對GGT進行選擇性、高靈敏、實時、可視化檢測，對于疾病診斷和病理生理研究具有重要意義。
　　本論文主要開展了以下工作:
　　1.以鄰硝

2、基芐硫醇，4-羥甲基-7-甲氧基香豆素和乙酰丙酸為原料設計合成了一種新型光活化硫化氫供體，并通過1H NMR，13C NMR和MS對其結構進行了表征。該硫化氫供體自身熒光微弱，在經(jīng)過365nm強光照射后，快速釋放出硫化氫，同時釋放熒光物質(zhì)（7-甲氧基香豆素）乙酰丙酸甲酯。采用亞甲基藍法對光照釋放的硫化氫進行檢測，并用色譜法對光裂解所釋放的（7-甲氧基香豆素）乙酰丙酸甲酯進行了分析檢測。在365nm光照3-9min時間檢范圍內(nèi)，該硫化氫供

3、體的熒光強度與釋放的硫化氫量呈動態(tài)學相關性。通過監(jiān)測熒光強度的變化，可間接監(jiān)測硫化氫的釋放過程。
　　2.以4-氯-7-硝基苯并呋咱和谷胱甘肽為原料設計合成了一種新的GGT熒光探針，并用MS對其結構進行了表征。此探針在475 nm激發(fā)光激發(fā)下，發(fā)出微弱熒光;經(jīng)GGT作用后，相同的激發(fā)波長下，探針溶液發(fā)出明亮的綠色熒光，最大發(fā)射波長為538nm。通過紫外光譜實驗，結合相關文獻工作，推測探針對酶的響應機理為酶切谷氨酰胺鍵之后自發(fā)進行S