用于檢測超氧陰離子和多硫化氫的多響應熒光探針的合成及應用.pdf

1、近幾年的研究表明，超氧陰離子（O2）是存在于細胞中的眾多活性氧（ROS）中最重要的一種，其在不同的生理和病理過程中起著重要的作用。在廣泛研究一氧化碳和一氧化氮之后，硫化氫（H2S）作為一種內源性氣體信號分子開始被重視，被認為可在生命體內發(fā)揮重要的作用。在心血管系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)中，H2S都起到了十分重要的調節(jié)生理功能的作用。通過最近的研究發(fā)現(xiàn)，越來越多的證據(jù)都表明，多硫化氫（H2Sn）實際上是生理活動的信號分子，硫化氫只是多硫化氫生理活動中

2、所釋放的標志物，同時有研究表明，多硫化氫的產生是依賴于活性氧對細胞的刺激并產生于線粒體中。我們報道了兩種用于檢測超氧陰離子和多硫化氫的多響應近紅外熒光探針。一種用于檢測細胞線粒體中的超氧陰離子和多硫化氫，一種用于檢測癌細胞中的超氧陰離子和多硫化氫。探針利用間硝基苯作為多硫化氫的響應基團，選取對芐基氯作為線粒體定位基團；生物素作為癌細胞的定位基團。在多種活性氧物種和活性硫物種的存在下，該探針對超氧陰離子和多硫化氫具有高選擇性。我們還驗證了

3、胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）和血管內皮生長因子（VEGF）對多硫化氫的產生起著重要的作用。探針還成功的應用于檢測活細胞外源性以及內源性的超氧陰離子和多硫化氫，同時還應用于小鼠和荷瘤鼠模型內的熒光成像。論文共分為五章，內容如下：
　　1、熒光探針的熒光成像技術、花菁熒光團和熒光探針的設計機理簡介。綜述了已發(fā)表的用于檢測超氧陰離子的熒光探針和用于檢測多硫化氫的熒光探針，開發(fā)具有多響應的近紅外熒光探針對于研究生命過程具有極其深遠的意義。

4、
　　2、介紹了新型多響應近紅外熒光探針的設計和合成的具體步驟，并介紹了熒光探針檢測超氧陰離子和多硫化氫的檢測機理。
　　3、利用合成的新型熒光探針進行體外對超氧陰離子和多硫化氫的檢測，使用紫外可見分光光度計和熒光分析儀對探針的性能進行了評估，同時對熒光探針在不同pH值條件下的穩(wěn)定性、選擇性和化學動力學進行了分析。
　　4、利用合成的熒光探針進行細胞內以及生物體內的超氧陰離子和多硫化氫的檢測，使用激光共聚焦顯微鏡和小動