流感病毒亞單位疫苗制備工藝的研究.pdf

1、流感是一種流感病毒引起的嚴(yán)重性呼吸道疾病。接種流感疫苗是被公認(rèn)的預(yù)防流感發(fā)生與傳播的最佳方法。目前市場上的流感疫苗，主要以流感病毒裂解疫苗為主，疫苗保護(hù)效率高，但在3歲以下的嬰幼兒和60歲以上的老年人群體中，安全性相對較差。為解決這個問題，獲得更加經(jīng)濟(jì)、高效、安全的流感疫苗，本論文進(jìn)行了流感亞單位疫苗的研究。
　　采用雞胚培養(yǎng)流感病毒，對流感亞單位疫苗制備工藝的幾個重要環(huán)節(jié)進(jìn)行試驗研究。研究了H1N1、H3N2、B三種不同型別毒株

2、的種子批的培養(yǎng)條件和傳代次數(shù)，表明三種型別的流感病毒毒株在雞胚傳代5代是穩(wěn)定的，建立了種子批。試驗了三株毒種孵育溫度、收獲時間和接種不同日齡的雞胚等對流感病毒的影響，建立了培養(yǎng)工藝。H1N1、H3N2型應(yīng)接種于11日齡的雞胚、35℃孵育、48h收獲，B型接種于10日齡的雞胚、35℃孵育、72h收獲，從而降低制備的成本。研究了甲醛濃度、處理時間等的影響，確定了不同毒株的滅活最有效條件：置4℃，H1N1型用0.1％甲醛滅活72h；H3N2和

3、B型毒株，0.05%甲醛，滅活48h，規(guī)范了滅活工藝規(guī)程。研究了不同截留分子量、不同膜面積的超濾膜對活性組分的濃縮效果，用截留分子量為30萬、膜面積為2.5m2的超濾膜包進(jìn)行10倍超濾濃縮，優(yōu)化了制備工藝規(guī)程。研究了不同時間、裂解劑濃度的影響，建立了置15~25℃下，加入1.2%的裂解劑（Triton N-101），裂解30~50min的裂解工藝。對疫苗成品進(jìn)行了穩(wěn)定性考察，在此工藝下制備的疫苗具有穩(wěn)定的質(zhì)量。
　　本研究為進(jìn)一步